紅松松仁分離蛋白的制備及降血脂功能研究.pdf

1、紅松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)是我國東北部林區(qū)的鄉(xiāng)土樹種，紅松籽仁富含多種人體必須的營養(yǎng)成分，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值。蛋白質(zhì)是一類功能性大分子物質(zhì)，具有多方面的生理功能。紅松松仁含有豐富的蛋白質(zhì)，其蛋白質(zhì)含量達(dá)到20％以上。本論文以紅松松仁蛋白為研究對象，對其提取工藝和分離方法進(jìn)行了研究。并且通過動物試驗(yàn)，檢驗(yàn)了松仁蛋白的降脂功能。
　　本論文以紅松松仁為原料，采用索氏提取法對從松仁中提取脫脂粉的

2、工藝進(jìn)行了研究，分別考察了提取時(shí)間、提取溫度和料液比對松仁脫脂率的影響，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了正交試驗(yàn)，優(yōu)化后的提取條件是提取時(shí)間為8h、提取溫度為65℃、料液比為1∶25;在最優(yōu)條件下，得到松仁脫脂率為62.1％。然后采用超聲波輔助堿提酸沉法對從松仁脫脂粉中提取蛋白質(zhì)的工藝進(jìn)行了研究，分別考察了提取溫度、超聲時(shí)間、pH值和料液比對蛋白質(zhì)提取率的影響，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了響應(yīng)面試驗(yàn)，優(yōu)化后的提取條件是提取時(shí)間為66.9min、提取溫度為47.3℃

3、、pH值為9.24、料液比為1∶29.25;在最優(yōu)條件下，得到松仁蛋白的提取率為89.47％。根據(jù)Osborne的分類和命名，即將蛋白質(zhì)分為水溶蛋白、鹽溶蛋白和醇溶蛋白，所以采用順序提取法即依次提取水溶蛋白、鹽溶蛋白和醇溶蛋白。
　　使用提取的水溶蛋白、鹽溶蛋白和醇溶蛋白作為受試劑，將小鼠隨機(jī)分為11組，除1組為普通對照組外，其他10組給予高脂飼料，每周稱重一次，建立肥胖模型。肥胖模型建立后，普通對照組和高脂對照組分別灌胃生理鹽水

4、(1.2g/kg bw)，紅松松仁水溶蛋白、鹽溶蛋白和醇溶蛋白低、中、高劑量組分別灌胃0.6g/kg bw、1.2g/kg bw和2.4g/kg bw的相應(yīng)蛋白。連續(xù)4周后，分別測定小鼠血清總膽固醇(TC)、血清甘油三脂(TG)、血清低密度脂蛋白(LDL-C)、血清高密度脂蛋白(HDL-C)、肝臟總膽固醇(TC)、肝臟甘油三脂(TG)、肝臟丙二醛(MDA)及肝臟脂褐質(zhì)(LP)的含量。試驗(yàn)結(jié)果表明，與高脂對照組相比，紅松松仁水溶蛋白能顯著

5、降低血清TC水平(P＜0.05)、血清TG水平(P＜0.05)、血清LDL-C水平(P＜0.05)、肝臟TC水平(P＜0.01)、肝臟TG水平(P＜0.01)、肝臟MDA水平(P＜0.01)和肝臟LP水平(P＜0.01)，而能極顯著性的升高血清HDL-C水平(P＜0.01);紅松松仁鹽溶蛋白能顯著降低血清TC水平(P＜0.01)、血清TG水平(P＜0.01)、血清LDL-C水平(P＜0.05)、肝臟TC水平(P＜0.01)、肝臟TG水平

6、(P＜0.01)、肝臟MDA水平(P＜0.01)和肝臟LP水平(P＜0.01)，而能極顯著性的升高血清HDL-C水平(P＜0.01);紅松松仁醇溶蛋白能顯著降低血清TC水平(P＜0.01)、血清TG水平(P＜0.01)、血清LDL-C水平(P＜0.05)、肝臟TC水平(P＜0.01)、肝臟TG水平(P＜0.01)、肝臟MDA水平(P＜0.01)和肝臟LP水平(P＜0.01)，而血清HDL-C水平(P＜0.01)顯著升高。
　　水溶

7、蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清總膽固醇(TC)降低了15.5％、21.4％和28.8％;鹽溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清總膽固醇(TC)降低了13.9％、18.8％和23.9％;醇溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清總膽固醇(TC)降低了17.1％、24.1％和30.8％。水溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清甘油三酯(TG)降低了4.4％、12.5％和17.6％;鹽溶蛋白低劑量

8、組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清甘油三酯(TG)降低了2.9％、8.8％和13.2％;醇溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清甘油三酯(TG)降低了8.1％、14.0％和19.1％。水溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)降低了22.1％、27.7％和31.4％;鹽溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)降低了16.3％、24.4％和27.9

9、％;醇溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)降低了29.1％、32.6％和38.4％。水溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)升高了12.4％、24.4％和31.5％;鹽溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)升高了8.5％、18.6％和27.6％;醇溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠血清高密度脂蛋白膽固

10、醇(HDL-C)升高了17.2％、28.7％和36.9％。水溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟總膽固醇(TC)降低了13.9％、24.7％和35.3％;鹽溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟總膽固醇(TC)降低了7.9％、16.8％和26.3％;醇溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟總膽固醇(TC)降低了17.9％、29.9％和39.4％。水溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟甘油三酯(

11、TG)降低了10.3％、21.3％和29.4％;鹽溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟甘油三酯(TG)降低了6.2％、16.5％和25.6％;醇溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟甘油三酯(TG)降低了13.9％、25.9％和31.3％。水溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟丙二醛(MDA)降低了5.6％、19.3％和30.3％;鹽溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟丙二醛(MDA)降低了

12、3.2％、12.6％和23.8％;醇溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟丙二醛(MDA)降低了8.4％、22.7％和33.3％。水溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟脂褐質(zhì)（LP）降低了12.3％、24.6％和35.9％;鹽溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟脂褐質(zhì)(LP)降低了5.1％、19.8％和31.4％;醇溶蛋白低劑量組、中劑量組和高劑量組分別使小鼠肝臟脂褐質(zhì)(LP)降低了16.5％、27.2