廣西圓斑蝰蛇蛇毒NGF對Aβ-,25-35-誘導(dǎo)AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及機制的初探.pdf

1、目的：通過從廣西圓斑蝰蛇蛇毒中分離純化的NGF對可溶性Aβ25-35誘導(dǎo)的AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及其初步作用機制的研究，探討蛇毒NGF在治療阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性疾病方而的應(yīng)用前景。
　　 方法：小鼠進行側(cè)腦室埋管后隨機分為假手術(shù)組，AD模型組，陽性藥對照組(吡拉西坦注射液，0.02mg·μ l-1)，NGF1組(0.2μ g·μl-1)，NGF2組(0.28μ g·μ l-1)，NGF3組(0.4μ g·μ l-1)

2、，NGF4組(0.56μ g·μ l-1)，NGF5組(0.8μ g·μ l-1)。并設(shè)立正常對照組(各組均n=10)。采用Morris水迷宮及跳臺行為實驗，考察廣西圓斑蝰蛇蛇毒NGF對Aβ25-35所致癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力的作用。通過HE染色及尼氏染色法觀察小鼠腦組織病理學(xué)改變，采用比色法檢測小鼠腦組織膽堿能系統(tǒng)(AchE,Ach,ChAT)的變化與腦組織抗氧化指標(SOD,MDA,GSH,T-AOC)的變化，初步探討廣西圓斑蝰蛇蛇

3、毒NGF對Aβ25-35誘導(dǎo)的AD模型小鼠的治療作用機制。本實驗選用吡拉西坦作為陽性藥物。
　　 結(jié)果：1 NGF對AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響：在Morris水迷宮實驗中，隨著水迷宮訓(xùn)練天數(shù)的增加，各組小鼠(除NGF最高劑量組外)尋找水下平臺潛伏期基本上逐漸縮短。在第7天的測試中，與空白對照組比較，假手術(shù)組小鼠穿越平臺次數(shù)及目標象限活動時間無明顯差別，而AD模型組小鼠明顯減少，有統(tǒng)計學(xué)差別(P＜0.05)。與AD組小鼠比較，

4、NGF1，2組小鼠兩項指標有所變化，但無統(tǒng)計學(xué)意義，NGF3，4組小鼠變化均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01或P＜0.05)。跳臺實驗中，與正常對照組比較，模型組小鼠第6d跳下平臺的潛伏期明顯縮短(P＜0.01)，3 min內(nèi)跳下平臺的錯誤次數(shù)明顯增多(P＜0.01)；而假手術(shù)組小鼠無明顯變化。與AD模型組小鼠相比，NGF1，2，3，4組小鼠兩項指標變化均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01或P＜0.05)。2 NGF對AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力改善作

5、用機制：HE及Nissl染色檢測發(fā)現(xiàn)，與正常對照組相比，模型組小鼠腦組織海馬神經(jīng)細胞線變得不清晰，細胞排列稀疏，正常細胞數(shù)目減少，假手術(shù)組無明顯變化。NGF各劑量組中，NGF4組與模型組相比，海馬神經(jīng)細胞數(shù)目變多，排列較整齊，細胞線比較清晰，NGF1，2，3組均無明顯變化。與正常對照組比較，假手術(shù)組小鼠腦組織AchE，Ach，ChAT，SOD，MDA，GSH，T-AOC活性無明顯區(qū)別，而模型組小鼠均有顯著變化(P＜0.01)。與模型組相

6、比，各劑量組NGF小鼠腦組織各指標活性變化均與劑量變化呈正相關(guān)，其中NGF2組Ach，SOD，GSH活性變化具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，NGF3，4組各指標變化均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)，NGF5組Ach，SOD活性也有較顯著變化(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 結(jié)論：濃度為0.4μ g·μ l-1及0.56μg·μ l-1的廣西圓斑蝰蛇蛇毒NGF對Aβ25-35誘導(dǎo)AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力有一定程