海洋生物Ⅰ號(hào)抗癌活性成分提取、溶解及抑癌作用研究.pdf

1、本研究的目的是提取海洋生物Ⅰ號(hào)抗癌活性成分，探討二甲基亞砜(DMSO)、吐溫-80、卵磷脂3種助溶劑對(duì)該活性成分的促溶作用，進(jìn)一步研究該活性成分對(duì)人低分化鼻咽癌細(xì)胞系CNE-2Z、肝癌細(xì)胞系Bel-7402、卵巢癌細(xì)胞系HO8910PM的生長(zhǎng)抑制作用。 [方法]取新鮮海洋生物Ⅰ號(hào)，脫水后打碎，95％食用酒精浸泡數(shù)次，取浸泡液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到乙醇粗提物。采用減壓干柱柱層析法將乙醇粗提物用有機(jī)溶劑洗脫，依次得到石油醚、乙酸乙脂、正丁醇

2、提取物(以下分別簡(jiǎn)稱提取物A、B、C)。選用DMSO、吐溫-80、卵磷脂作為助溶劑，肉眼觀察和MTT法測(cè)定不同助溶劑對(duì)3種提取物的促溶效果，確定最佳助溶劑。用最佳助溶劑溶解海洋生物Ⅰ號(hào)3種提取物，MTT法研究其對(duì)人低分化鼻咽癌細(xì)胞系CNE-2Z、肝癌細(xì)胞系Bel-7402、卵巢癌細(xì)胞系HO8910PM的生長(zhǎng)抑制作用，Karber公式計(jì)算3種提取物對(duì)多種癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制的IC50值。 [結(jié)果]減壓干柱柱層析法洗脫海洋生物Ⅰ號(hào)乙醇粗提

3、物，依次得到提取物A、B、C。分別采用DMSO、吐溫-80、卵磷脂作為助溶劑溶解提取物，發(fā)現(xiàn)卵磷脂對(duì)癌細(xì)胞無(wú)毒性作用，對(duì)提取物的溶解度最大，溶解的藥液清晰透亮，MTT結(jié)果顯示卵磷脂對(duì)提取物的促溶效果最明顯。海洋生物Ⅰ號(hào)提取物抗癌細(xì)胞生長(zhǎng)活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：3種提取物對(duì)人低分化鼻咽癌細(xì)胞系CNE-2Z生長(zhǎng)均有抑制作用，抑制率隨濃度增加而增加，隨作用時(shí)間延長(zhǎng)而提高，呈明顯的劑量和時(shí)間效應(yīng)。提取物B的抑制率最高，500μg/ml和1000μg/

4、ml濃度作用48h時(shí)的抑制率分別高達(dá)90.26％和99.17％，明顯高于5-Fu的抑制率(86.65％)，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有非常顯著性意義(P＜0.01)。提取物C的抑制率稍低，500μg/ml和1000μg/ml濃度作用48h時(shí)的抑制率分別為80.46％和90.38％，與5-Fu的抑制率相近。提取物A的抑制率最低，500μg/ml和1000μg/ml濃度作用48h時(shí)的抑制率僅為48.75％和60.25％，明顯低于5-Fu的抑制率。3種提取物

5、在相同濃度、相同作用時(shí)間的抑制率比較統(tǒng)計(jì)學(xué)差異具有非常顯著性意義(P＜0.01)。3種提取物對(duì)肝癌細(xì)胞系Bel-7402、卵巢癌細(xì)胞系HO8910PM的抑制作用與對(duì)CNE-2Z的抑制作用相似。3種提取物對(duì)3種癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制的IC50測(cè)定結(jié)果顯示，提取物B的IC50值最低，提取物C次之，提取物A最大。以上結(jié)果表明，海洋生物Ⅰ號(hào)提取物B和C具有較高的抗癌活性，對(duì)多種癌細(xì)胞均有顯著的生長(zhǎng)抑制作用。 [結(jié)論](1)減壓干柱柱層析法能進(jìn)一