紅菜薹小孢子培養(yǎng)及DH-,1-代的初步研究.pdf

1、紅菜薹(Brassicacampestrisssp.chinensisL.var.utilisTsenetLee.)是原產(chǎn)我國的特種蔬菜，種質(zhì)資源十分豐富，其品種改良?xì)v來受到蔬菜育種工作者的重視。紅菜薹的雜交親本的選育目前主要使用常規(guī)方法，雖然成效顯著，但也存在一些不足，比如，育種時間長，育成一個穩(wěn)定優(yōu)良自交系一般需要5-7年，甚至更長的時間，從它們中選育自交系尤其費事、費工。 小孢子培養(yǎng)技術(shù)已成為當(dāng)前國內(nèi)外植物生物技術(shù)領(lǐng)域中最

2、活躍的研究課題之一。采用該技術(shù)獲得雙單倍體，從中選育可以用作雜交種的親本，純化速度快，純合度高。本實驗對5個基因型的紅菜薹進(jìn)行小孢子培養(yǎng)研究，并對其小孢子第二代株系進(jìn)行了品質(zhì)分析，農(nóng)藝性狀的分析以及自交不親和性的測定，主要結(jié)果如下： 1.基因型的篩選：對5個不同來源的紅菜薹基因型，進(jìn)行小孢子培養(yǎng)，篩選出2個較易出胚的基因型，它們是：BJ和SZ；產(chǎn)胚量最高的BJ是產(chǎn)胚量最低的SZ的8.5倍，而其余的三個基因型都沒有誘導(dǎo)出胚。

3、 2.在培養(yǎng)基中添加0.1mg/ml的活性炭對紅菜薹小孢子培養(yǎng)的胚胎發(fā)生具有較為明顯的作用，能增加胚狀體的產(chǎn)量。其中活性炭對BJ的效果最明顯，產(chǎn)胚量平均為2.25個/蕾，對照為0.375個/蕾，處理是對照的6.33倍；SZ其次，平均0.375個/蕾，對照為0.33個/蕾，處理是對照的1.13倍，沒有胚狀體產(chǎn)生的基因型未列出。 3.對花蕾進(jìn)行冷處理影響小孢子的胚胎發(fā)生，以BJ為例，冷處理2天出胚的效果最好，達(dá)到了2.37個/蕾，

4、冷處理1天、3天、4天的出胚率分別為0.375個/蕾、0.75個/蕾、0.234個/蕾。冷處理5天和不進(jìn)行冷處理沒有胚胎發(fā)生。 4.小孢子的培養(yǎng)密度也對胚胎發(fā)生有影響，以每ml培養(yǎng)基接種的花蕾數(shù)進(jìn)行比較實驗發(fā)現(xiàn)，1.0個/ml的產(chǎn)胚率最高，達(dá)到了2.88個/蕾，其次為1.5個/ml,達(dá)到了2.38個/蕾，而0.5個/ml和2.0個/ml的處理則沒有誘導(dǎo)出胚。 5.對BJ基因型小孢子DH1代植株Vc含量，蛋白質(zhì)含量，可溶性

5、糖的含量進(jìn)行測定，通過分析發(fā)現(xiàn)后代株系的差異十分顯著，各個株系之間比較差異也很明顯，說明小孢子后代分離很明顯。 6.通過BJ基因型小孢子DH1代植株的花期和蕾期授粉實驗表明，紅菜薹小孢子植株是典型的自交不親和類型，其自花結(jié)實率很低，只有極少數(shù)的植株通過花期授粉獲得了種子。通過蕾期授粉，發(fā)現(xiàn)植株的親和指數(shù)不高，親和指數(shù)超過5的植株占群體的40％，最高的為7.17。 7.小孢子DH1代植株的農(nóng)藝性狀進(jìn)行調(diào)查和統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)紅菜薹