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文檔簡介
1、趨化因子SDF-1α及其受體CXCR4在胚胎發(fā)育、腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移及介導(dǎo)免疫缺陷病毒(HIV) 感染等方面起著重要作用。最近研究表明SDF-1α在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中高表達(dá),SDF-1α/CXCR4與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系已經(jīng)引起重視。 本研究首先探討ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞上SDF-1α表達(dá)的影響,然后用SDF-1α處理的THP-1單核細(xì)胞上對(duì)CXCR4的表達(dá)進(jìn)行研究,最后對(duì)SDF-1α/CXCR4在單核細(xì)胞/血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附的作用進(jìn)行研
2、究。 目的: ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞SDF-1α表達(dá)的影響;SDF-1α對(duì)THP-1單核細(xì)胞上CXCR4表達(dá)的影響;SDF-1α和CXCR4抗體干預(yù)對(duì)THP-1單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附的影響;以便探討SDF-1α促進(jìn)單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附作用的機(jī)制。 方法:RT-PCR檢測SDF-1α和CXCR4 mRNA的表達(dá),Western blot檢測其蛋白表達(dá)變化,觀察ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞上SDF-1α表達(dá)的劑量和時(shí)間效應(yīng),觀察
3、SDF-1α對(duì)THP-1單核細(xì)胞CXCR4表達(dá)的影響。用靜態(tài)黏附實(shí)驗(yàn)來研究THP-1與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附,用25μg/ml ox-LDL或不同濃度SDF-1α處理內(nèi)皮細(xì)胞48h或30min后,將THP-1單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞共孵育后洗脫檢測黏附作用,并加用不同濃度的CXCR4抗體阻斷。 結(jié)果:SDF-1α在正常的血管內(nèi)皮細(xì)胞上幾乎不表達(dá),ox-LDL可以上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞上SDF-1α表達(dá),0-125μg/ml ox-LDL處理48h,隨o
4、x-LDL濃度增加,SDF-1α的表達(dá)亦逐漸增強(qiáng),當(dāng)ox-LDL濃度為25μg/ml 處理48h,SDF-1α表達(dá)到達(dá)峰值。用25μg/ml ox-LDL與內(nèi)皮細(xì)胞孵育0-48h,隨著處理時(shí)間的延長,SDF-1α表達(dá)逐漸的增強(qiáng),在48h時(shí),SDF-1α的表達(dá)達(dá)到最大。100ng/ml SDF-1α可以上調(diào)THP-1 單核細(xì)胞上CXCR4的表達(dá)。Ox-LDL可以增強(qiáng)THP-1與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附,25μg/ml ox-LDL處理組THP-1與
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