腸癌SW-620腫瘤細(xì)胞SP亞群初步研究.pdf

1、目的分析腸癌細(xì)胞系SW-620中腫瘤干細(xì)胞相關(guān)的SP(side population)亞群比例，分選出相關(guān)的SP和NSP細(xì)胞，并初步鑒別相關(guān)的SP是否具有干細(xì)胞某些相關(guān)的生物學(xué)特性。 方法：（1）制備SW-620細(xì)胞懸液，經(jīng)Hoechst33342和PI染色(其中一組同時(shí)加入拮抗劑維拉帕米作為對(duì)照)，流式細(xì)胞儀分析SP亞群。（2）通過流式細(xì)胞儀分選出腸癌細(xì)胞系SW-620中SP和NSP細(xì)胞。（3）克隆形成實(shí)驗(yàn)和MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SP

2、和NSP細(xì)胞增值能力的差異。（4）裸鼠體內(nèi)成瘤對(duì)比實(shí)驗(yàn)證明SP細(xì)胞和NSP細(xì)胞致瘤性。 結(jié)果:（1）SP亞群占SW-620細(xì)胞的0.1％－1％，維拉帕米阻斷后減少為0％。（2）流式細(xì)胞儀分選出SP細(xì)胞7.5×105個(gè)，其余大部分為非SP細(xì)胞。（3）克隆形成實(shí)驗(yàn)和MTT實(shí)驗(yàn)證實(shí)SP細(xì)胞和NSP細(xì)胞增值能力有顯著差異。（4）裸鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：105個(gè)SP細(xì)胞可以致裸鼠成瘤，105個(gè)NSP細(xì)胞及以下數(shù)量級(jí)別細(xì)胞不能致裸鼠成瘤結(jié)論：