碘硒干預(yù)對(duì)自身免疫性甲狀腺炎抗氧化及凋亡的影響.pdf

1、目的:研究微量元素碘和硒在自身免疫性甲狀腺炎過(guò)程中對(duì)自身抗體水平及抗氧化能力的影響；探討碘和硒對(duì)自身免疫性甲狀腺炎過(guò)程中凋亡蛋白表達(dá)的影響；探索并檢驗(yàn)一種簡(jiǎn)便高效的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性甲狀腺炎動(dòng)物模型的建立方法。 方法: 1.將雌性Lewis大鼠隨機(jī)分成兩組，即對(duì)照組和模型組。對(duì)模型組進(jìn)行甲狀腺球蛋白免疫，免疫用量為0.8 mg pTg/只，每?jī)芍?次，共3次，第3次免疫完成后處死動(dòng)物取材檢測(cè)。檢測(cè)自身抗體甲狀腺球蛋白抗體(

2、TGAb)及甲狀腺微粒體抗體(TMAb)水平，觀察甲狀腺病理變化并對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)；2.對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性甲狀腺炎模型(EAT)大鼠給予不同水平的碘干預(yù)，具體是適碘飼料(0.90 mg I/kg)，高碘飼料(18 mg I/kg)，低碘飼料(<0.02 mg I/kg)，飼養(yǎng)一段時(shí)間后檢測(cè)其自身抗體、肝臟和腦組織抗氧化能力及甲狀腺凋亡蛋白的變化；3.先對(duì)大鼠實(shí)施不同劑量的硒干預(yù)2周，然后免疫建立EAT模型，其中硒干預(yù)劑量設(shè)置分別是適硒組喂

3、飼普通飼料(含Se0.20 mg/kg)，高硒組喂飼高硒飼料(含Se2.00 mg/kg)，低硒組喂飼低硒飼料(含Se0.02 mg/kg)，每日硒攝入量約為：適硒組4μg，高硒組40μg，低硒組0.4μg，觀察自身抗體、抗氧化能力及凋亡蛋白的變化；4.對(duì)EAT大鼠同時(shí)施加不同劑量的碘和硒干預(yù)，具體是將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成6組，分別為造模+高碘補(bǔ)硒組(M+I+Se+組)、造模+高碘適硒組(M+I+Se組)、造模+高碘低硒組(M+I+Se組)

4、、造模+低碘補(bǔ)硒組(M+I-Se+組)、造模+低碘適硒組(M+I-Se組)、造模+低碘低硒組(M+I-Se-組)，其中碘和硒的劑量分別為高碘(I+，18 mg I/kg)，低碘(I-，<0.02 mg I/kg)，硒劑量分組分別為適硒(Se，含Se0.20 mg/kg)，高硒(Se+，含Se2.00mg/kg)，低硒(Se-，含Se0.02 mg/kg)，觀察其自身抗體、肝臟和腦組織抗氧化能力及甲狀腺凋亡蛋白的變化情況，分析其中的主效應(yīng)

5、及交互作用。 結(jié)果: 1.免疫完成后試驗(yàn)大鼠甲狀腺出現(xiàn)明顯的病理改變，自身抗體TGAb及TMAb水平明顯升高，EAT模型建立成功，成模率達(dá)到100％；2.不同碘攝入狀態(tài)下自身抗體仍然處于較高水平，無(wú)明顯變化(F1=0.716，P=0.501；F2=0.716，P=0.501)，適碘(M)及高碘(M+I+)時(shí)大鼠肝臟SOD及GPx活性均顯著高于低碘(M+I-)組(F1=20.82，P=0.000；F2=4.05，P=0.0

6、35)，高碘組肝臟GPx和SOD活性較適碘組均呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)，但差異未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，適碘組及低碘組大鼠腦組織GPx活性均顯著高于高碘組(F=10.82，P<0.001)，而在不同碘水平下腦組織中SOD活性變化不明顯，M+I+組及M+I+組大鼠FasL、Bcl-2蛋白表達(dá)量均顯著高于M組，且M+I-組大鼠FasL蛋白顯著高于M+I+組(F1=114.78，P1=0.000；F2=5.67，P2=0.006)。M+I-組大鼠TRAIL表

7、達(dá)量顯著高于M組(F=55.45，P=0.000)，Caspase-3表達(dá)量顯著高于M+I+組(F=16.46，P=0.000)；3.不同硒攝入時(shí)自身抗體TGAb、TMAb水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但自身抗體水平有隨補(bǔ)硒劑量增高呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，各組間大鼠GPx活性差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與適硒組(M)相比，補(bǔ)硒組(Se++M)活性明顯升高，而低硒組(Se-+M)GPx活性顯著下降，(P<0.05)，其中Se++M組GPx活性最高，

8、Se-+M組與其余兩實(shí)驗(yàn)組相比，GPx活性明顯降低(P<0.05)，各組大鼠肝組織SOD活性差異不明顯；4.硒碘干預(yù)組析因分析顯示硒碘聯(lián)合對(duì)自身抗體沒(méi)有交互作用，在對(duì)肝臟SOD活性的影響中主要以碘的效應(yīng)為主(F=47.26，P=0.000)，在對(duì)肝臟GPx活性影響中，碘、硒均有作用，補(bǔ)硒可升高肝臟GPx活性(F=9.26，P=0.000)。腦中SOD活性未見(jiàn)碘、硒有明顯作用，而腦GPx活性同樣均受到碘、硒的影響，析因分析表明碘和硒可影響

9、Fas，Bax的表達(dá)，碘還可影響FasL的表達(dá)，而B(niǎo)cl-2的表達(dá)以硒為主效應(yīng)，對(duì)TRAIL、Caspase-3的表達(dá)，硒碘存在交互作用。 結(jié)論: 1.本研究采用異種Tg作為免疫原建立EAT模型的方法可靠、快速、易于實(shí)行；2.碘過(guò)量及碘缺乏均可加劇EAT大鼠甲狀腺細(xì)胞凋亡，促進(jìn)EAT的病理改變，引起機(jī)體抗氧化能力降低，但尤以碘缺乏時(shí)嚴(yán)重；3.適量補(bǔ)硒可降低體內(nèi)自身抗體TGAb和TMAb的滴度，明顯提高GPx活性，增強(qiáng)了機(jī)