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1、目的:探討亞硒酸鈉對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性甲狀腺炎(EAT)大鼠甲狀腺細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制研究。 方法:Wistar大鼠分為正常對(duì)照組(A組)、自身免疫性甲狀腺炎(EAT)組(B組)和EAT加硒干預(yù)組(C組)。制備EAT大鼠模型,EAT加硒干預(yù)組大鼠給予亞硒酸鈉灌胃。放射免疫法(RIA)測(cè)定甲狀腺自身抗體水平,HE染色觀察甲狀腺形態(tài)學(xué)變化,TUNEL法標(biāo)記甲狀腺凋亡細(xì)胞,免疫組織化學(xué)SABC法檢測(cè)甲狀腺組織Caspase-3、Bax
2、、Bcl-2蛋向表達(dá)及分布,并應(yīng)用美國(guó)Sample PCI圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行平均吸光度值測(cè)定,實(shí)時(shí)定量PCR法對(duì)甲狀腺細(xì)胞凋亡相關(guān)基因bax、bcl-2、Fas、FasL mRNA進(jìn)行定量測(cè)定,ELISA法檢測(cè)血清細(xì)胞因子IFN-Y、IL-4、IL-10的水平。 結(jié)果:(1)正常對(duì)照組、EAT組、EAT加硒干預(yù)組的TgAb分別為(6.94±1.13)%、(36.24±3.64)%、(17.23±2.90)%,TmAb分別為(5.9
3、6±1.40)%、(27.12±5.06)%、(15.98±2.45)%。與EAT組相比,EAT加硒干預(yù)組TgAb、TmAb水平明顯下降(P<0.05)。(2)與EAT組相比,硒干預(yù)組凋亡的甲狀腺細(xì)胞明顯減少,甲狀腺濾泡破壞程度減輕,淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)減少(P<0.05)。(3)與EAT組相比,EAT加硒干預(yù)組大鼠甲狀腺組織Caspase-3陽(yáng)性表達(dá)明顯減少,Bax陽(yáng)性表達(dá)多位于浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞附近的濾泡上皮,Bcl-2陽(yáng)性表達(dá)多位于濾泡結(jié)構(gòu)較完
4、整的區(qū)域(P<0.05)。EAT組大鼠甲狀腺組織Caspase-3陽(yáng)性表達(dá)與Bax陽(yáng)性表達(dá)之間呈正相關(guān)(r=0.89,P<0.01),Caspase-3陽(yáng)性表達(dá)與Bcl-2陽(yáng)性表達(dá)之間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.85,P<0.01)。(4) EAT加硒干預(yù)組甲狀腺組織Bcl-2 mRNA水平高于EAT組,Bax mRNA水平低于EAT組(P<0.05),Bcl-2/Bax升高(P<0.05)。硒干預(yù)EAT組甲狀腺Fas mRNA和FasL mR
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