內(nèi)毒素膜受體TLR4、CD14與炎癥反應(yīng)的基礎(chǔ)與臨床研究.pdf

1、第一部分,TLR4基因多態(tài)性的研究.目的:基因?qū)W研究發(fā)現(xiàn)人類TLR4基因第四外顯子第896位的A/G錯義突變可導致TLR4蛋白299位的天冬氨酸被甘氨酸取代(也稱"Asp299Gly"基因多態(tài)性),并導致TLR4受體的細胞外域發(fā)生改變.國外有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)這一單核苷酸多態(tài)性(SNP)可影響LPS的信號轉(zhuǎn)導,被認為可能在人類對內(nèi)毒素的反應(yīng)及膿毒癥的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用,具有重要的研究價值.由于突變攜帶者在人群中比例很低,要在人群中開展這

2、方面的研究,首先必須建立一種適合較大規(guī)模地檢測、方便、快速的內(nèi)毒素膜受體TLR4基因多態(tài)性"Asp299Gly"的方法,以便進一步研究該位點對人內(nèi)毒素反應(yīng)及膿毒癥病人病理生理的影響.第二部分,外周血體外培養(yǎng)加內(nèi)毒素刺激的實驗研究.目的:建立用于人類內(nèi)毒素反應(yīng)研究的全血細胞培養(yǎng)加內(nèi)毒素刺激的實驗模型,觀察不同濃度內(nèi)毒素刺激對全血細胞產(chǎn)生細胞因子TNFα、IL-6、IL-10的影響,觀察不同濃度的內(nèi)毒素刺激對單核細胞表面TLR4、CD14蛋

3、白的影響,了解內(nèi)毒素反應(yīng)的分子機制.第三部分,圍術(shù)期內(nèi)毒素受體TLR4、CD14及細胞因子的變化.目的:圍術(shù)期炎癥細胞因子的變化被認為與臨床預后息息相關(guān),而內(nèi)毒素膜受體被認為是炎癥反應(yīng)的重要初始環(huán)節(jié),是炎癥信號轉(zhuǎn)導最上游的關(guān)鍵分子,因此圍術(shù)期內(nèi)毒素膜受體的變化及調(diào)控機制的闡明對深入研究和探索圍術(shù)期炎癥反應(yīng)的分子機制有著非常重要的意義,可能為我們提供新思路,為防治過敏性炎癥反應(yīng)及免疫失衡,合理調(diào)控免疫反應(yīng),為術(shù)后膿毒癥、多臟器功能衰竭等嚴