COX-2抑制劑干預(yù)對體外培養(yǎng)的EMs間質(zhì)細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的： （1）觀察COX-2抑制劑對體外培養(yǎng)的內(nèi)異癥間質(zhì)細(xì)胞增殖的影響。 （2）探討COX-2抑制劑對體外培養(yǎng)的內(nèi)異癥細(xì)胞干預(yù)的機(jī)制。（3）探討COX-2抑制劑在治療子宮內(nèi)膜異位癥中的應(yīng)用價(jià)值。 方法： 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本選取12例異位內(nèi)膜標(biāo)本取自山東省立醫(yī)院婦產(chǎn)科2006年3月至2007年1月因卵巢型內(nèi)異癥行手術(shù)的患者，均經(jīng)病理證實(shí)為EMs。正常對照組：25例取自同期因各種原因行診斷性刮宮或?qū)m腔鏡檢查后經(jīng)病理學(xué)診斷為

2、正常的增生期或分泌期的子宮內(nèi)膜標(biāo)本。無菌收集實(shí)驗(yàn)組患者異位囊腫增厚的部分囊內(nèi)壁及對照組內(nèi)膜組織進(jìn)行，一部分用10％多聚甲醛固定，用于組織學(xué)研究，一部分分離間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)，用于Nimesulide與Celecoxib對異位內(nèi)膜細(xì)胞增殖影響的研究。步驟如下： 1.取10％多聚甲醛中固定的異位內(nèi)膜及正常內(nèi)膜組織，脫水、包埋、切片，烤干。石蠟切片行HE染色，并行免疫組化檢測COX-2水平。 2.分離并培養(yǎng)內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞，傳代并進(jìn)入對

3、數(shù)生長期后分別行Celecoxib及Nimesulide干預(yù)，MTT法檢測不同濃度及時(shí)間下抑制率，繪制細(xì)胞生長曲線。 3.EIA法檢測COX-2抑制劑干預(yù)后PGE2水平。 4.流氏細(xì)胞術(shù)檢測COX-2抑制劑干預(yù)后凋亡率及細(xì)胞周期分布。 結(jié)果： 1.免疫組化檢測COX-2水平; 異位內(nèi)膜組COX-2水平顯著高于對照組（P<0.05）。 2.MTT檢測; 選擇性COX-2抑制劑Cele

4、coxib及Nimesulide均能抑制體外培養(yǎng)的異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的增殖，且呈時(shí)間濃度劑量依賴關(guān)系。 3.PGE2水平檢測; 選擇性COX-2抑制劑Celecoxib及Nimesulide能抑制體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜異位癥間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的PGE2，且呈時(shí)間濃度劑量依賴。 4.凋亡檢測; COX-2抑制劑干預(yù)后的細(xì)胞其凋亡率明顯增加，與對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且呈時(shí)間濃度劑量依賴關(guān)系。 5.細(xì)胞周期檢測

5、; 流氏細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示，COX-2干預(yù)后的細(xì)胞，其位于G0/G1期比率明顯增加，與對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且呈時(shí)間濃度劑量依賴。 結(jié)論: 1.COX-2在內(nèi)異癥發(fā)生及發(fā)展中起重要作用 2.COX-2抑制劑可以明顯抑制體外培養(yǎng)的內(nèi)異癥間質(zhì)細(xì)胞，并呈時(shí)間濃度計(jì)量依賴性 3.COX-2抑制劑通過COX-2依賴及非COX-2依賴途徑抑制間質(zhì)細(xì)胞的增殖： （1）COX-2抑制劑通過抑制COX-2的