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文檔簡介
1、目的:應用脂肪源干細胞(adipose-derived stem cells,ADSCS)與聚乳酸-己內酯(poly(lactide/ε-caprolactone),PLCL)纖維進行復合培養(yǎng),觀察ADSCS在PLCL材料上的生物學表現(xiàn),研究PLCL材料對ADSCS的增殖、粘附及向平滑肌細胞誘導分化的影響,評估PLCL材料的生物相容性,為尿道損傷的修復尋找合適的支架材料。
方法:用靜電紡紗技術合成PLCL,應用I型膠原酶酶
2、解法分離出附睪附近脂肪源干細胞,選用傳代細胞差速貼壁培養(yǎng)后,對提取細胞進行純化,采用鼠源性兔CD105分子的單克隆抗體運用流式細胞術進行脂肪干細胞鑒定,將純化、鑒定后的第五代ADSCS與PLCL材料結合培養(yǎng),用MTT法檢測材料對細胞增殖的影響,并計算細胞在材料上的粘附率,在PLCL材料上對脂肪干細胞進行成平滑肌誘導分化,運用RT-PCR法對誘導細胞進行平滑肌早期標志物α-Actin基因的檢測。
結果:ADSCS與PLCL復
3、合培養(yǎng)后,細胞生長良好;運用MTT法測得實驗組(有PLCL材料)與對照組(無PLCL材料)吸光度值存在顯著性差異,實驗組吸光度值明顯高于對照組;用細胞計數器測得有PLCL材料組較無PLCL材料組細胞粘附更顯著;在PLCL表面誘導ADSCS向平滑肌細胞分化后,運用RT-PCR技術,實驗組α-Actin基因陽性條帶亮度稍強于對照組。
結論:PLCL纖維材料可促進ADSCS的粘附及增殖,對其向平滑肌細胞方向的分化過程影響不大,P
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