兩株深海來源真菌活性次級代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、深海來源微生物生存環(huán)境特殊,其次級代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)新穎、活性獨特,是新型藥物先導(dǎo)化合物的重要來源。本論文針對抗腫瘤活性,采用了活性篩選和現(xiàn)代化學(xué)篩選相結(jié)合的方法,對深海來源微生物進(jìn)行分離和篩選,選取其中2株具有抗腫瘤活性真菌進(jìn)行了活性次級代謝產(chǎn)物的系統(tǒng)研究。
　　 從采自太平洋深海海域的20個海泥樣品中分離得到了108株微生物(60株真菌、18株放線菌、30株細(xì)菌)。采用SRB法,以小鼠白血病P388腫瘤細(xì)胞株為篩選模型進(jìn)行體外抗腫

2、瘤活性的一級、二級篩選,并結(jié)合HPLC指紋圖譜及薄層色譜進(jìn)行化學(xué)篩選,得到具有較強腫瘤細(xì)胞增殖抑制活性的菌株22株(10株放線菌和12株真菌)。對12株活性真菌進(jìn)行發(fā)酵條件摸索,以其中2株(ZLN-57、ZLN-60)作為主要研究對象進(jìn)行大量發(fā)酵,系統(tǒng)研究其活性次級代謝產(chǎn)物;同時對另外兩株深海來源真菌(ZLN-30、ZLN-29)進(jìn)行了小量發(fā)酵,初步研究其主要活性產(chǎn)物。
　　 對發(fā)酵產(chǎn)物的乙酸乙酯提取物采用薄層色譜、正相及反相硅

3、膠柱色譜、LH-20凝膠柱色譜、高壓液相色譜等現(xiàn)代分離純化手段,從ZLN-57(Penicillium griseofulvum)的次級代謝產(chǎn)物中分離得到20個單體化合物(1-17,29-31);從ZLN-60的次級代謝產(chǎn)物中分離得到12個單體化合物(18-25,32-35);從菌株ZLN-30、ZLN-29的少量發(fā)酵浸膏中分別得到1個(26)和6個(27-28,36-39)單體化合物,共39個化合物。
　　 利用現(xiàn)代波譜學(xué)(I

4、R,UV,MS,NMR,X-ray)結(jié)合化學(xué)反應(yīng)的方法(乙?；磻?yīng)等)確定了其中28個化合物(1-28)的化學(xué)結(jié)構(gòu)(化合物結(jié)構(gòu)及名稱參見Table 1),其中新化合物8個。新化合物結(jié)構(gòu)類型包括:吲哚二酮哌嗪類生物堿(1-3)、二苯醚類化合物(19-22)和環(huán)多肽(23),部分新化合物的構(gòu)型研究正在進(jìn)行中。已知化合物包括9個吲哚二酮哌嗪類生物堿(4-12)、1個吲哚醛衍生物(13),5個苯的衍生物(14-16、24、28)、1個二苯醚類化

5、合物(18)、1個腦苷脂(25)和3個聚酮類化合物(17、26、27)。
　　 通過DPPH分光測定法初步評價了化合物1-3的抗氧化活性,化合物1-3具有中等強度的抗氧化活性,IC50分別為:135、120和91μM;新化合物的抗腫瘤活性正在評價過程中。
　　 綜上,本文從深海海泥樣品中共分離篩選出22株(10株放線菌和12株真菌)具有細(xì)胞毒活性的菌株;從其中4株真菌中發(fā)現(xiàn)了39個次級代謝產(chǎn)物,闡明了其中28個單體化合物