2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  以TCDD為代表的二噁英是典型的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,二噁英可透過(guò)胎盤屏障,由胎盤及乳汁進(jìn)入胚胎及嬰兒體內(nèi),引發(fā)宮內(nèi)及哺乳期二噁英暴露。世界衛(wèi)生組織2012年的文章指出,環(huán)境內(nèi)分泌干擾物可對(duì)兒童早期發(fā)育產(chǎn)生不良影響,不僅包括引起隱睪、尿道下裂、青春期提前,還可影響兒童神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育,對(duì)智力、行為和情感造成不良影響。健康與疾病的發(fā)育起源理論(Developmental Origins of Health and Disease

2、,DOHaD)指出,宮內(nèi)敏感時(shí)期及出生早期暴露于干擾,會(huì)改變器官功能與結(jié)構(gòu)編碼(重新編碼),進(jìn)而引發(fā)暴露個(gè)體以后生命過(guò)程中發(fā)生行為學(xué)習(xí)障礙。本實(shí)驗(yàn)希望就宮內(nèi)暴露于環(huán)境內(nèi)分泌干擾物TCDD對(duì)子代神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育及記憶學(xué)習(xí)能力的影響進(jìn)行探究,同時(shí)對(duì)造成這些影響的機(jī)制進(jìn)行一定的探索。
  內(nèi)容和方法:
  本研究主要探討TCDD宮內(nèi)暴露對(duì)F1代雄鼠神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、神經(jīng)行為及空間記憶學(xué)習(xí)能力的影響,主要內(nèi)容總結(jié)如下。
  1.TCD

3、D宮內(nèi)暴露實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立:Sprague-Dawley大鼠(SD大鼠)適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后合籠交配,陰栓出現(xiàn)即認(rèn)為交配成功,并記為孕期第0天(GD0)。將孕鼠隨機(jī)分為兩個(gè)TCDD劑量組(劑量分別為200,800ng/kg bw)和溶劑對(duì)照組(玉米油+DMSO)。于孕期第8-14天(GD8-14)每日定時(shí)灌胃染毒。雄性子鼠出生后21天(PND21天)離乳分籠,并繼續(xù)飼養(yǎng),直至雄鼠達(dá)到成年期(PND90)。
  2.F1代雄鼠出生早期

4、神經(jīng)行為發(fā)育評(píng)價(jià):F1代雄性仔鼠于PND5天接受早期神經(jīng)行為發(fā)育測(cè)試,同時(shí)觀察并記錄其開眼時(shí)間。早期神經(jīng)行為學(xué)測(cè)試包括:平面翻正實(shí)驗(yàn)、懸崖回避實(shí)驗(yàn)和負(fù)趨地性實(shí)驗(yàn)。此外在PND10-PND15天期間,持續(xù)對(duì)雄鼠開眼情況進(jìn)行觀察并記錄每只雄鼠的開眼時(shí)間,直至所有雄鼠均開眼為止。
  3.成年F1代雄鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn):F1代雄鼠繼續(xù)飼養(yǎng)至出生后90天(PND90)時(shí),進(jìn)行Morris水迷宮(Morris Water Maze)測(cè)

5、試,以評(píng)價(jià)宮內(nèi)TCDD暴露對(duì)子代雄鼠成年時(shí)空間記憶及學(xué)習(xí)能力的影響。根據(jù)Nature推薦的實(shí)驗(yàn)流程,水迷宮實(shí)驗(yàn)為期6天,1-5天為定位巡航實(shí)驗(yàn),第6天為空間探索實(shí)驗(yàn)。定位巡航實(shí)驗(yàn)中,受試大鼠每天接受4次訓(xùn)練,記錄各實(shí)驗(yàn)大鼠逃避潛伏期、累積路程、各象限停留耗時(shí)、各象限路程等指標(biāo)。第6天記錄受試動(dòng)物穿越原平臺(tái)次數(shù)、目標(biāo)象限耗時(shí)及路程。同時(shí)試驗(yàn)還對(duì)大鼠游泳策略進(jìn)行評(píng)價(jià)分析。
  4.F1代成年雄鼠血清激素水平檢測(cè):本實(shí)驗(yàn)采用直接化學(xué)發(fā)光

6、法測(cè)定雄性大鼠血清中睪酮和雌二醇的水平,采用 ADVIA-Centaur全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)儀(ADVIA-Centaur XP,Simens,Germany)及其配套試劑盒進(jìn)行檢驗(yàn)。雄性大鼠血清中甲狀腺激素五項(xiàng)的水平也使用該方法進(jìn)行檢測(cè),甲狀腺五項(xiàng)包括FT3、FT4、TSH、TT3和TT4。
  5.F1代雄鼠海馬組織神經(jīng)系統(tǒng)免疫組化:將固定好的雄鼠海馬組織制作成石蠟切片,采用神經(jīng)元尼氏染色法,對(duì)海馬神經(jīng)元進(jìn)行染色,并于光

7、鏡下計(jì)數(shù)海馬組織神經(jīng)元數(shù)量。采用膠質(zhì)細(xì)胞酸性蛋白免疫組化法對(duì)海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞活性情況進(jìn)行分析。
  結(jié)果:
  1.宮內(nèi)TCDD暴露造成F1代雄鼠早期神經(jīng)行為發(fā)育改變,800ng/kg bw劑量組雄鼠PND5表現(xiàn)出更高的活動(dòng)力,同時(shí)開眼時(shí)間明顯提前。
  2.宮內(nèi)TCDD暴露造成F1代雄鼠成年空間記憶與學(xué)習(xí)能力受損。Morris水迷宮中,兩個(gè)TCDD劑量組雄鼠表現(xiàn)均較對(duì)照組差,特別是800ng/kg bw組雄鼠在游泳速

8、度、逃離潛伏期、穿越原平臺(tái)次數(shù)上均不及對(duì)照組。這與800nk/kg bw劑量組雄鼠出生早期時(shí)活動(dòng)力由于對(duì)照組形成有趣對(duì)比。但對(duì)各組大鼠游泳策略分析并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)顯著差異。
  3.宮內(nèi)TCDD暴露造成F1代雄鼠血清激素水平改變。研究發(fā)現(xiàn),兩個(gè)劑量組雄鼠血清雌二醇水平均低于對(duì)照組,并且800nk/kg bw組與對(duì)照組的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。甲狀腺激素水平?jīng)]有明顯變化。
  4.宮內(nèi)TCDD暴露造成F1代雄鼠海馬神經(jīng)系統(tǒng)免疫組化染色改變

9、。研究發(fā)現(xiàn),宮內(nèi)TCDD暴露并未對(duì)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元數(shù)量及形態(tài)造成顯著影響,但染毒后出現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞活性明顯下降現(xiàn)象。
  結(jié)論:
  通過(guò)以上實(shí)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn),宮內(nèi)暴露于TCDD的F1代雄性大鼠神經(jīng)行為發(fā)育受到影響,表現(xiàn)為早期神經(jīng)行為發(fā)育提前,而成年后空間記憶與學(xué)習(xí)能力受到損傷。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),空間記憶與學(xué)習(xí)能力受損可能與海馬組織星形膠質(zhì)細(xì)胞受損相關(guān)。對(duì)成年 F1代雄鼠體內(nèi)性激素水平測(cè)定顯示,雌二醇水平下降,這提示海馬星形膠

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