高轉(zhuǎn)移乳腺癌誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞選擇性激活.pdf

1、研究目的：
　　 1.乳腺癌細(xì)胞是否能直接選擇性激活巨噬細(xì)胞
　　 2.不同生物學(xué)特性的乳腺癌細(xì)胞株在選擇性激活巨噬細(xì)胞作用上是否不同。
　　 研究方法：
　　 收集了不同乳腺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)上清，加入巨噬細(xì)胞培養(yǎng)，通過ELISA檢測不同處理的巨噬細(xì)胞CCL18的分泌情況，通過qRT-PCR檢測CCL18mRNA表達(dá)。通過間接免疫熒光染色和熒光共聚焦顯微鏡檢測CCL18和巨噬細(xì)胞特異性標(biāo)記CD68。通過EL

2、ISA檢測不同處理的巨噬細(xì)胞IL10和IL12的分泌情況，通過流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面標(biāo)志CD163和HLA-DR表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 1.未經(jīng)處理的巨噬細(xì)胞呈圓形，核漿比大，并且呈CCL18陰性。低轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞MCF7和BT-474刺激的巨噬細(xì)胞和未經(jīng)處理的巨噬細(xì)胞無明顯區(qū)別。形成明顯對(duì)比的是，經(jīng)過高轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞培養(yǎng)上清，特別是MDA-MB-231上清刺激的巨噬細(xì)胞胞體明顯拉長成梭形，并伸出偽足，核漿比增大

3、，同時(shí)呈CCL18強(qiáng)陽性。
　　 2.檢測其他巨噬細(xì)胞選擇性激活標(biāo)記發(fā)現(xiàn)，高轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞株誘導(dǎo)大量CD163highHLA-DRlowIL10highIL12low表型的選擇性激活巨噬細(xì)胞。相比之下，低轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞株無激活巨噬細(xì)胞的能力。
　　 結(jié)論：
　　 1.高轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞能直接通過分泌細(xì)胞因子誘導(dǎo)大量CD163highHLA-DRlowCCL18highIL10highIL12low表型的選擇性激活巨