血清OPN表達及其編碼基因SPP1多態(tài)與胃癌及癌前疾病發(fā)病風險的研究.pdf

1、胃癌是最常見的消化道惡性腫瘤，發(fā)病率居全球惡性腫瘤的第四位。全球每年新發(fā)胃癌約93萬例，絕大部分在發(fā)展中國家，中國是胃癌高發(fā)國家，中國的胃癌死亡率在男性為40.8/10萬，女性為18.6/10萬，分別是歐美國家的4.2～7.9倍和3.8～8.0倍。早期診斷率低是中國胃癌死亡率高的重要原因之一。臨床診斷胃癌的主要手段包括體格檢查、影像學檢查、胃鏡下取活組織病理學檢查以及血清學腫瘤標志物的檢查等。其中，大多數(shù)診斷技術難以做出胃癌的早期診斷，

2、而血清學指標?？梢栽诔霈F(xiàn)臨床癥狀及影像學改變之前出現(xiàn)表達水平的異常，并且具有取材方便，價格低廉，創(chuàng)傷小等優(yōu)勢，在腫瘤高危人群的篩查和早期診斷中占有重要的地位。因此，尋找理想的診斷效能較高的血清學檢測指標，對于胃癌的防治具有十分重要的現(xiàn)實意義。
　　骨橋蛋白OPN(osteopontin，OPN)是一種分泌型磷酸化糖蛋白，具有多種生理功能，包括參與細胞的黏附、遷移和增殖，誘導新生血管形成，參與炎癥反應和免疫應答，參與細胞信號傳導等。

3、OPN廣泛存在于多種組織和細胞，在血清、尿液、膽汁等體液中也能被檢測到。近年來研究發(fā)現(xiàn)OPN在多種腫瘤組織中呈明顯的高表達，腫瘤患者的血清OPN水平也明顯升高，提示OPN與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關。OPN能否做為診斷胃癌及其癌前疾病的理想的血清學檢測指標？其診斷效能如何？受哪些因素影響？調節(jié)機制怎樣？答案尚不清楚。
　　OPN的編碼基因SPP1位于人類染色體4q22.1，由7個外顯子和6個內含子組成。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)SPP1存在151個SNPs

4、位點，已有研究表明，SPP1基因多態(tài)性與自身免疫性疾病、炎癥性疾病、心腦血管疾病和泌尿系統(tǒng)結石等疾病的遺傳易感性有關。SPP1基因多態(tài)與胃癌及其癌前疾病的關系如何？SPP1基因多態(tài)對血清OPN表達水平的影響如何？結論尚不明確。
　　目的:
　　闡明血清OPN與胃癌及其癌前疾病發(fā)病風險的關系，探討其做為胃癌血清學檢測指標的應用價值。闡明OPN編碼基因SPP1多態(tài)與胃癌及其癌前疾病發(fā)病風險的關系，及其對血清OPN水平的影響。為胃

5、癌的篩查和早期診斷提供有用的理論參考和實驗依據。
　　方法:
　　共收集血液標本1853例，其中男性1063例，女性790例。胃癌病例組478例來源于中國醫(yī)大一院腫瘤外科及遼寧省腫瘤醫(yī)院胃癌患者;萎縮性胃炎組649例，來源于中國醫(yī)大一院胃控門診及遼寧莊河地區(qū)篩查病例;對照組為淺表性胃炎，來源于1998-2011遼寧莊河地區(qū)的健康篩查人群。以胃癌及萎縮性胃炎為病例組分別與淺表性胃炎按照年齡、性別進行配比。以問卷調查或病歷記錄方

6、法收集所有研究對象的年齡、性別和相關臨床資料，并與其簽署知情同意書。以酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清OPN和HP抗體的表達。以酚.氯仿法提取DNA，以基因測序法和飛行時間質譜法檢測SPP1多態(tài)基因型。
　　結果:
　　論文一、血清OPN含量與胃癌及其癌前疾病發(fā)病風險的關系
　　總體人群分析:由淺表性胃炎→萎縮性胃炎→胃癌，血清OPN含量逐級升高，血清OPN含量在腸型胃癌與彌漫型胃癌組間無顯著差異。
　　亞

7、組分析:血清OPN表達水平與受檢者年齡成正相關，與性別相關（男性高于女性），與HP感染狀態(tài)無關。
　　診斷效能分析:
　　血清OPN含量對萎縮性胃炎的診斷效能:總體人群分析:診斷效能具有統(tǒng)計學意義(p=0.002)，最適cut-off值為1.33 ng/ml，ROC曲線下面積為0.555，敏感度和特異度分別為61.6％和49.4％。亞組分析:男性小于50歲組診斷效能有統(tǒng)計學意義，p=0.001，最適cut-off值為1.33

8、ng/ml，ROC曲線下面積為0.648，敏感度和特異度分別為69.4％和60.6％;女性小于50歲組診斷效能有統(tǒng)計學意義，p=0.024，最適cut-off值為0.52ng/ml，ROC曲線下面積為0.591，敏感度和特異度分別為93.4％和28.3％;其余亞組診斷效能無統(tǒng)計學意義。
　　血清OPN對胃癌的診斷效能:總體人群分析:診斷效能具有統(tǒng)計學意義(p=0.000)，最適cut-off值為2.56 ng/ml，ROC曲線下面

9、積為0.805，敏感度和特異度分別為74.3％和71.8％;以性別、年齡（50歲為界））分層進行亞組分析:各亞組中血清OPN對胃癌的診斷效能均具有統(tǒng)計學意義（p均小于0.001）。男性小于50歲組最適cut-off值為2.43ng/ml，ROC曲線下面積為0.746，敏感度和特異度分別為71.8％和66.7％;男性大于50歲組最適cut-off值為2.68ng/ml，ROC曲線下面積為0.833，敏感度和特異度分別為84.3％和68.4

10、％;女性小于50歲組最適cut-off值為1.71 ng/ml，ROC曲線下面積為0.786，敏感度和特異度分別為83.3％和68.8％;女性大于50歲組最適cut-off值為2.48ng/ml, ROC曲線下面積為0.762，敏感度和特異度分別為72.9％和70.0％。
　　論文二、OPN編碼基因SPP1啟動子區(qū)SNPs與胃癌及其癌前疾病發(fā)病風險的關系
　　1、SPP1啟動子區(qū)SNP rs11730582與萎縮性胃炎的發(fā)病

11、風險
　　總體人群分析:rs11730582多態(tài)位點的各種基因型及等位基因與萎縮性胃炎的發(fā)病風險無關（p值均大于0.05）。
　　亞組分析:rs11730582多態(tài)位點的各種基因型及等位基因在不同性別、年齡（50歲為界）、HP感染狀態(tài)各亞組中與萎縮性胃炎的發(fā)病風險均無關(p值均大于0.05)。
　　2、SPP1啟動子區(qū)rs11730582 SNP與胃癌的發(fā)病風險
　　總體人群分析:rsl1730582多態(tài)位點的各

12、種基因型及等位基因與胃癌的發(fā)病風險無關(p值均大于0.05)。
　　亞組分析:在50歲以下人群中，攜帶rs11730582 CC基因型者比攜帶TT基因型者發(fā)生胃癌的風險降低0.321倍(p=0.015，OR.0.321，95％Cl:0.118-0.876)
　　論文三、SPP1基因多態(tài)性對血清OPN蛋白表達的影響
　　總體人群分析:rs11730582三種基因型對血清OPN蛋白水平沒有影響。亞組分析:按性別、年齡(50

13、歲為界)將三種疾病病例分為不同亞組，比較各亞組中攜帶rs11730582 TT、CT、CC三種基因型的血清OPN表達水平，均未見明顯差異，p值均大于0.05。
　　結論:
　　1、血清OPN表達水平與胃癌及其癌前疾病萎縮性胃炎的發(fā)病風險密切相關，并且隨著疾病程度的加重成逐漸升高的趨勢。
　　2、OPN蛋白表達水平男性高于女性，與年齡成正相關，與HP感染狀態(tài)無關。
　　3、血清OPN用于胃癌診斷效能較好，最適cut