哮喘大鼠模型支氣管平滑肌肌球蛋白輕鏈激酶表達(dá)的研究.pdf

1、目的：復(fù)制支氣管哮喘(簡稱：哮喘)大鼠模型，研究其支氣管平滑肌肌球蛋白輕鏈激酶(myosinlightchainkinase，MLCK)在哮喘發(fā)生發(fā)展過程中表達(dá)的變化規(guī)律；探討地塞米松(dexamethason，DXM)對哮喘模型中大鼠支氣管平滑肌MLCK表達(dá)的影響，為進(jìn)一步闡明哮喘的發(fā)病機(jī)理及開拓治療新途徑打下基礎(chǔ)。 方法：SD大鼠32只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周。隨機(jī)分為正常對照組(n=8)、哮喘模型組(激發(fā)1周組，n=8和激發(fā)2周組

2、，n=8)和DXM治療組(n=8)。以卵蛋白(0VA)致敏和激發(fā)建立大鼠哮喘模型。DXM治療組大鼠每次激發(fā)前1小時給予大鼠腹腔注射地塞米松0.5mg/kg。觀察大鼠激發(fā)后支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細(xì)胞計數(shù)以及肺組織切片HE染色，再結(jié)合大鼠激發(fā)后反應(yīng)來鑒定模型是否已建立。用免疫組織化學(xué)法和免疫印跡法分析各組大鼠支氣管平滑肌中MLCK表達(dá)情況。 結(jié)果：成功建立起支氣管哮喘大鼠模型，哮喘模型組大鼠BALF中白細(xì)胞總數(shù)及嗜酸粒細(xì)胞數(shù)

3、明顯多于正常對照組和DXM治療組(P＜0.01)。肺組織切片HE染色顯示模型組大鼠支氣管縮窄，部分支氣管上皮脫落，支氣管及小血管周圍有大量嗜酸粒細(xì)胞，中性粒細(xì)胞等炎細(xì)胞浸潤。DXM組大鼠可見支氣管周圍有少許同樣細(xì)胞浸潤。對照組大鼠未見明顯異常。經(jīng)免疫組織化學(xué)法分析，哮喘模型中激發(fā)1周組和2周組大鼠支氣管平滑肌MLCK表達(dá)較對照組高，差異有顯著性(P＜0.05)，同時2周組大鼠支氣管平滑肌MLCK表達(dá)又高于1周組，差異有顯著性(P＜0.0

4、5)；DXM組大鼠支氣管平滑肌MLCK表達(dá)較激發(fā)2周組低(P＜0.05)，與對照組比較差異無顯著性(P＞0.05)。經(jīng)免疫印跡法檢測，哮喘模型中激發(fā)1周組和2周組MLCK表達(dá)也均明顯高于對照組，激發(fā)2周組MLCK增高更為明顯；同時，DXM組MLCK表達(dá)低于激發(fā)2周組。 結(jié)論：哮喘發(fā)病中存在支氣管平滑肌MLCK表達(dá)增強(qiáng)，且隨發(fā)病時間延長表達(dá)更為顯著，推測在支氣管哮喘的發(fā)病機(jī)制中可能存在MLCK的參與；另地塞米松可下調(diào)哮喘大鼠支氣管