細(xì)胞周期調(diào)控基因P21及胰島素樣生長(zhǎng)因子-1在大鼠視網(wǎng)膜發(fā)育期的表達(dá).pdf

1、目的：觀察大鼠視網(wǎng)膜發(fā)生發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞周期調(diào)控基因P21及胰島素樣生長(zhǎng)因子-.(IGF-1)表達(dá)的時(shí)空變化特點(diǎn)，結(jié)合視網(wǎng)膜發(fā)育的組織學(xué)變化規(guī)律，探討P21及IGF-1對(duì)組織學(xué)變化的影響，推測(cè)其在視網(wǎng)膜發(fā)生發(fā)育過(guò)程中所起的作用。 方法：清潔型SD大鼠，分為胚胎期各組，生后期各組及成年期組。胚胎期又分為孕14天(E1.d)、孕16天(E16d)、孕18天(E18d)、孕20天(E2.d)組，出生后大鼠按日齡分為3天(.3)、8天(P

2、8)、15天(P15)、21天(P21)、成年鼠(12月齡Ad)組，每組各5只。用HE染色方法觀察視網(wǎng)膜發(fā)育的組織學(xué)變化，用免疫組織化學(xué)方法、半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(revers.transcription-polymeras.chai.reaction，RT-PCR)方法分別檢測(cè)視網(wǎng)膜P21及IGF-1蛋白及mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：HE染色結(jié)果顯示E14d視網(wǎng)膜分二層結(jié)構(gòu)，外層為色素上皮層，內(nèi)層為神經(jīng)母細(xì)胞層；E18d神經(jīng)母

3、細(xì)胞層分內(nèi)外兩層；E20d內(nèi)叢狀層明顯，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層多層排列；P8d，內(nèi)外叢狀層均出現(xiàn)，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層單層排列；P15d，視網(wǎng)膜十層結(jié)構(gòu)分化完全；P21的陽(yáng)性表達(dá)主要定位于胞核內(nèi)，胚胎期主要表達(dá)于神經(jīng)母細(xì)胞層，色素上皮層也見(jiàn)表達(dá)。在E14d可見(jiàn)弱陽(yáng)性表達(dá)，隨胎齡增加，陽(yáng)性表達(dá)逐漸增高，于E18d出現(xiàn)最強(qiáng)的陽(yáng)性表達(dá)，以后逐漸減低，直到成年期仍可見(jiàn)P21的弱表達(dá)，成年期主要定位于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)外叢狀層。IGF-1在胚胎發(fā)育期的表達(dá)規(guī)律是隨胎

4、齡增加表達(dá)逐漸增強(qiáng)，陽(yáng)性表達(dá)主要定位于胞核內(nèi)，神經(jīng)母細(xì)胞層陽(yáng)性細(xì)胞明顯。E18d可見(jiàn)最強(qiáng)的陽(yáng)性表達(dá)，E20d可見(jiàn)較強(qiáng)的陽(yáng)性表達(dá)，之后開(kāi)始逐漸下降，一直持續(xù)到P8d，自P8d至P21d，IGF-1的表達(dá)又有增強(qiáng)趨勢(shì)，成年期在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)外叢狀層仍可見(jiàn)IGF-1的弱陽(yáng)性表達(dá)。各期之間表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論：P21及IGF-1的表達(dá)規(guī)律說(shuō)明胚胎期存在活躍的細(xì)胞增殖與分化，視網(wǎng)膜的逐層發(fā)育正是在P21及IGF