殺傷性免疫球蛋白樣受體基因多態(tài)性和環(huán)境交互效應(yīng)與強(qiáng)直性脊柱炎關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的：強(qiáng)直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)是一種主要侵犯中軸骨骼,并可累及外周關(guān)節(jié)、肌腱韌帶附著點(diǎn)及其它組織的慢性炎癥性自身免疫性疾病。AS病因及發(fā)病機(jī)制目前尚不明確,其發(fā)生可能與遺傳、慢性感染、自身免疫功能紊亂和內(nèi)分泌失調(diào)等因素有關(guān)。一些研究發(fā)現(xiàn)殺傷性免疫球蛋白樣受體(killercell immunoglobulin-like receptor,KIR)與很多自身免疫性疾病有關(guān)。本研究旨在通過研究KIR

2、基因多態(tài)性與強(qiáng)直性脊柱炎易感性關(guān)聯(lián),并分析其與環(huán)境因素的交互效應(yīng)(gene-environmental interaction)在疾病中發(fā)病中的作用,為強(qiáng)直性脊柱炎的病因探索提供參考依據(jù)。
　　方法：收集2007年7月-2010年6月某三甲醫(yī)院風(fēng)濕科門診及住院的60例AS患者作為病例組,選擇60例同期體檢中心健康體檢者作為對照組,所有納入研究對象HLA-B27檢測均為陽性,對所有研究對象進(jìn)行16個(gè)KIR基因分型測定。另外對60例H

3、LA-B27陽性AS患者的B27亞型進(jìn)行測定。同時(shí)對所有AS患者進(jìn)行流行病學(xué)資料收集,調(diào)查患者的一般人口學(xué)特征(主要包括性別、年齡、民族、職業(yè)等)、BathAS功能指數(shù)(Bath Ankylosing Spondylitis Functional Index,BASFI)、BathAS疾病活動(dòng)指數(shù)(Bath Ankylosing Spondylitis Disease ActivityIndex,BASDAI)和環(huán)境因素暴露情況(主要包

4、括吸煙、飲酒、飲食等)。采集強(qiáng)直性脊柱炎患者及對照的外周靜脈血(約5ml),乙二胺四乙酸(ethylene diaminete tracetic acid,EDTA)抗凝并分離血漿,鹽析法提取DNA,采用序列特異性引物聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase chain reaction-sequence specific primer,PCR-SSP)分型技術(shù)對基因進(jìn)行分型鑒定。使用Epidata3.1對所有資料進(jìn)行雙重錄入并使用SPSS

5、13.0對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。基因環(huán)境交互效應(yīng)分析采用單純病例研究(case-onlystudy)的方法。
　　結(jié)果：60名AS患者中男性46例,女性14例,平均年齡為31.00±8.38歲;60名健康對照中男性44例,女性16例,平均年齡為29.31±7.42歲,兩組間性別比例和年齡構(gòu)成差異無顯著性。在對影響B(tài)ASFI和BASDAI指數(shù)的相關(guān)因素分析中發(fā)現(xiàn)女性相對于男性的BASFI和BASDAI得分均偏高

6、(allP<0.05),性別可能是影響B(tài)ASFI和BASDAI指數(shù)的因素。對所有樣本的KIR基因進(jìn)行檢測,檢測出KIR2DL1,KIR2DL2,KIR2DL3,KIR2DL4,KIR2DL5,KIR2DS1,KIR2DS2,KIR2DS3,KIR2DS4,KIR2DS5,KIR3DL1,KIR3DL2,KIR3DL3,KIR3DS1,假基因KIR2DP1和KIR3DP1共16個(gè)基因。其中KIR3DS1基因頻率在病例組和對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、意義(χ2=5.263,P=0.006,OR=3.059,95％CI=1.357~6.896),而在其他的KIR基因中則未發(fā)現(xiàn)。在對60個(gè)AS病人HLA-B27的檢測中共發(fā)現(xiàn)了5個(gè)B27亞型,包括B*2704(33,55%),B*2705(24,40%),B*2702(1,1.67%),B*2710(1,1.67%)和B*2715(1,1.67%)。在研究中并未發(fā)現(xiàn)KIR3DS1與B27亞型之間的關(guān)聯(lián)性(P>0.05)。通過單純病例研究

8、,發(fā)現(xiàn)KIR3DS1與噪聲環(huán)境因素存在交互效應(yīng)(P=0.017,OR=4.709,95%CI=1.245~17.813)。
　　結(jié)論：本次研究在所有樣本中均檢測出了目前已知的16個(gè)KIR基因。而在強(qiáng)直性脊柱炎患者中發(fā)現(xiàn)了5個(gè)HLA-B27亞型,分別是B2702,B2704,B2705,B2710和B2715。KIR3DS1可能作為一個(gè)風(fēng)險(xiǎn)基因與強(qiáng)直性脊柱炎的易感性存在關(guān)聯(lián),且這種關(guān)聯(lián)不依賴于其配體HLA-B27的亞型。性別可能是影