小麥轉(zhuǎn)錄因子基因TaNAC8B的表達(dá)分析與抗逆功能研究.pdf

1、干旱、高鹽以及極端溫度等不利因素嚴(yán)重影響植物的正常生長發(fā)育，使農(nóng)作物的產(chǎn)量下降、品質(zhì)降低。植物在長期的進(jìn)化過程中，形成了一系列調(diào)控機(jī)制以適應(yīng)或抵御不利環(huán)境的影響，轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控基因表達(dá)就是其中之一。轉(zhuǎn)錄因子可以通過與相應(yīng)的順式作用元件結(jié)合，調(diào)控相關(guān)基因的時(shí)空表達(dá)，響應(yīng)不同逆境脅迫。近年來植物特有且為最大的轉(zhuǎn)錄因子家族之一的NAC（NAM，ATAF與CUC）在抗逆功能方面的研究報(bào)道越來越多，但大部分研究工作都集中在模式植物擬南芥和水稻上，而

2、關(guān)于小麥NAC轉(zhuǎn)錄因子的功能研究還鮮有報(bào)道。本研究在實(shí)驗(yàn)室前期工作基礎(chǔ)上，分析了小麥NAC轉(zhuǎn)錄因子家族成員TaNAC8B基因的表達(dá)模式和轉(zhuǎn)錄激活活性；通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化法獲得了TaNAC8B過表達(dá)的轉(zhuǎn)基因煙草株系，并研究了其抗逆功能。主要研究成果如下：
　?。?）通過模擬不同逆境脅迫，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測了TaNAC8B基因的表達(dá)變化，發(fā)現(xiàn)PEG6000處理可顯著上調(diào)TaNAC8B的表達(dá)，而NaCl、ABA和低溫

3、等脅迫處理下TaNAC8B表達(dá)量沒有顯著變化。
　　（2）構(gòu)建pGBKT7-TaNAC8B真核表達(dá)載體，通過酵母自激活實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)TaNAC8B具有轉(zhuǎn)錄激活活性，且轉(zhuǎn)錄激活活性區(qū)域位于TaNAC8B C-端。
　?。?）利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)，成功將TaNAC8B轉(zhuǎn)入煙草并獲得陽性植株。通過對T1代種子的模擬逆境脅迫處理下的根長實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)TaNAC8B過表達(dá)植株表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗逆性。進(jìn)一步通過對幼苗的干旱脅迫處理，觀察