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1、第一部分超聲破壞微泡促進正常大鼠骨骼肌血管新生的時效關(guān)系研究 目的:探討超聲破壞微泡促進正常大鼠骨骼肌血管新生的時間-效應(yīng)關(guān)系。 方法:將48只健康SD大鼠隨機分為4組:對照組、單純超聲組、單純微泡組和超聲破壞微泡組。超聲破壞微泡組經(jīng)尾靜脈輸入自制的脂質(zhì)全氟丙烷微泡造影劑0.5 ml,隨即用頻率為1.0 MHz,聲強為2.0 W/cm2 的超聲在其大腿骨骼肌局部作用3 min;單純超聲組僅在骨骼肌局部用同等的超聲能量作用
2、;單純微泡組僅由尾靜脈輸入脂質(zhì)全氟丙烷微泡造影劑0.5 ml;對照組不作任何處理。處理結(jié)束后的第3、7、10、14、21、28 d,各組分別取兩只大鼠處死,取局部骨骼肌做石蠟切片HE染色觀察顯微結(jié)構(gòu)的變化,CD34免疫組化計數(shù)微血管密度(MVD),酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)定量評價血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達。 結(jié)果:超聲破壞微泡組有較多的血管新生;單純超聲組新生血管較少;單純微泡組和對照組未見血管新生。隨著時間的變化
3、,超聲破壞微泡組的MVD值和VEGF表達在第10 d達到高峰;單純超聲組的高峰出現(xiàn)在第14 d。 結(jié)論:超聲破壞微泡可刺激骨骼肌中內(nèi)源性VEGF較快、較多地分泌,從而更好地促進新生血管生成。 第二部分超聲破壞微泡促進下肢缺血大鼠骨骼肌血管新生的時效關(guān)系研究 目的:探討超聲破壞微泡促進下肢缺血大鼠骨骼肌血管新生的時間-效應(yīng)關(guān)系。 方法:將76只切斷雙側(cè)股動脈一周后的SD大鼠隨機分為4組:對照組、單純超聲組、
4、單純微泡組和超聲破壞微泡組。超聲破壞微泡組經(jīng)尾靜脈輸入脂質(zhì)全氟丙烷微泡造影劑0.5ml,隨即用1.0MHz,2.0W/cm2的超聲在其雙側(cè)大腿骨骼肌局部作用3 min;單純超聲組僅在骨骼肌局部用同等的超聲能量作用;單純微泡組僅由尾靜脈輸入脂質(zhì)全氟丙烷微泡造影劑0.5 ml;對照組不作任何處理。處理結(jié)束后的第3、7、10、14、21、28 d,用免疫組化、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、彩色多普勒血流顯像(CDFI)和國產(chǎn)DFY-Ⅱ型超聲
5、圖像定量分析診斷儀等方法檢測和觀察微血管密度(MVD)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達和血管新生的情況。 結(jié)果:超聲破壞微泡組有較多的血管新生,單純超聲組新生血管較少,單純微泡組和對照組也有少量血管新生。隨著時間的變化,超聲破壞微泡組的MVD值和VEGF表達在第7 d達到高峰,單純超聲組的高峰出現(xiàn)在第14 d;CDFI檢查和DFY-Ⅱ型診斷儀分析表明,超聲破壞微泡組可探及較多的血流信號(P<0.05)。 結(jié)論:用超聲
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