超聲破壞微泡對(duì)大鼠皮膚創(chuàng)面愈合影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討超聲輻照微泡破壞的方法是否可以刺激大鼠皮膚創(chuàng)面中內(nèi)源性VEGF的分泌,促進(jìn)創(chuàng)面中血管生成,從而促進(jìn)創(chuàng)面愈合,改善愈合質(zhì)量,希望為臨床治療提供一種新的思路和理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.96只SD大鼠,雌雄不限,隨機(jī)分成4組,即超聲破壞微泡組(US+MB),單純微泡組(MB),單純超聲組(US)和對(duì)照組。水合氯醛腹腔麻醉后建立大鼠皮膚創(chuàng)面模型。對(duì)所有創(chuàng)面碘伏消毒并外敷耦合劑,超聲破壞微泡組經(jīng)鼠尾靜脈注射微泡

2、造影劑0.5ml,注射后即刻進(jìn)行超聲輻照3min,選取的超聲能量為2.0W/CM2;單純微泡組經(jīng)鼠尾靜脈注射微泡造影劑0.5ml;單純超聲組經(jīng)鼠尾靜脈注射生理鹽水0.5ml,同樣條件超聲輻照3min;對(duì)照組經(jīng)鼠尾靜脈注射生理鹽水0.5ml;處理結(jié)束后,創(chuàng)面暴露不予包扎,各組大鼠單籠飼養(yǎng)。
　　 2.處理后每天觀察各組大鼠的一般情況、創(chuàng)面有無感染及肉芽組織生長(zhǎng)等大體情況。
　　 3.于創(chuàng)傷后第1、3、5、7、14、21天隨

3、機(jī)抽取各組大鼠4只,腹腔麻醉后固定,計(jì)算每組大鼠各時(shí)間點(diǎn)的創(chuàng)面愈合率。
　　 4.于上述各時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)抽取各組大鼠4只,腹腔麻醉后固定,探查創(chuàng)緣血流信號(hào)并記錄。
　　 5.于上述各時(shí)間點(diǎn)觀察后處死各組大鼠,切取創(chuàng)面組織于10％的中性福爾馬林中固定24小時(shí),石蠟包埋,常規(guī)HE染色,觀察創(chuàng)面組織,評(píng)價(jià)各組創(chuàng)面愈合情況。
　　 6.免疫組織化學(xué)觀察上述各時(shí)間點(diǎn)各組創(chuàng)面血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá)情況。
　　

4、 7.應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用單因素方差分析;計(jì)量資料采用獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn),以p＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.大體觀察:傷后第5、7和14天US+MB組創(chuàng)面愈合率高于其它3組(第5、14天p＜0.05,第7天p＜0.01)。
　　 2.CDFI:傷后第3天創(chuàng)面邊緣探血流信號(hào)最豐富,各組之間在各時(shí)間點(diǎn)的血流信號(hào)差異沒有顯著性(p＞0.0

5、5)。
　　 3.組織學(xué)檢測(cè)(HE染色):傷后第7天,US+MB組肉芽組織明顯比其它3組厚,新生毛細(xì)血管均垂直于創(chuàng)面生長(zhǎng),其它3組毛細(xì)血管排練紊亂。傷后第14天,US+MB組膠原纖維排列整齊,其內(nèi)可見再生的毛囊和皮脂腺,其它3組膠原排列欠整齊,僅見少量再生的毛囊和皮脂腺。
　　 4.免疫組織化學(xué)觀察VEGF表達(dá)變化情況:US+MB組在第3天形成表達(dá)高峰,其它3組表達(dá)高峰在第5到7天。在第3、5和7天US+MB組VEGF的