刺激隱核蟲（Cryptocaryon irritans）與多子小瓜蟲（Ichthyophthirius multifiliis）免疫學特性研究.pdf

1、中山大學博士學位論文刺激隱核蟲（Cryptocaryonirritans）與多子小瓜蟲（Ichthyophthiriusmultifiliis）免疫學特性研究姓名：羅曉春申請學位級別：博士專業(yè)：水生生物學指導教師：謝明權20050520構則通過透射電鏡進行觀察。結果表明粘膜組織中存在多種免疫相關細胞，包括杯狀細胞、淋巴細胞、巨噬細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞及中性粒細胞等。杯狀細胞分布于皮膚表皮、鰓上皮及腸道上皮層中，他們分泌的粘液形成了

2、機體對病害的第一道屏障。淋巴細胞在后腸腸道固有層及鰓血竇腔中相當豐富，在前腸固有層及皮膚表皮及真皮層問也有分布。淋巴細胞在粘膜組織中的存在提示粘液中的抗體可能是局部淋巴細胞分泌的。通過免疫組化的方法也在鰓和后腸中觀察到了抗體分泌細胞。巨噬細胞和粒細胞的分布情況與淋巴細胞類似，這些細胞在魚類粘膜免疫中的非特性免疫，及特異性免疫應答中的抗原呈遞中超到了重要的作用。在魚眼角膜中未觀察到免疫細胞的存在。本章還就魚類粘膜免疫系統(tǒng)的特異性及非特異性

3、免疫應答，以及粘膜免疫是否獨立于系統(tǒng)免疫等問題進行了討論。我們還建立了魚類皮膚體外培養(yǎng)的方法。通過對皮膚生長、黑色素細胞形態(tài)、細胞活率、皮膚組織學觀察及抗體分泌情況等指標的測試，證明該皮膚培養(yǎng)方法是成功的，該方法將有助于對魚類粘膜免疫應答的研究。在前面研究的基礎上，進一步對刺激隱核蟲引起的保護性免疫應答進行了研究。結果表明無論是腹腔注射還是體表感染，都可以引起石斑魚的保護性免疫應答。免疫魚血清和皮膚培養(yǎng)上清液中的抗體可以引起刺激隱核蟲幼

4、蟲的阻動。通過免疫組化實驗結果表明，引起免疫應答的蟲體抗原主要分布在細胞膜抗原，特別是其纖毛上。血清及皮膚上清液中的抗體效價通過ELlSA和阻動試驗進行測定，結果表明在初次免疫12周后的魚中可檢測到特異性抗體，抗體效價隨后逐漸升高，在46周時達到高峰，并在8周攻毒時，仍保持相當?shù)目贵w水平。攻毒實驗表明，免疫魚得到了很好的保護，而對照魚則全部死亡。這些結果表明體液免疫應答，特別是粘膜中的免疫應答對魚類抵御該病的侵害中，起了重要的作用疫苗將