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1、目的:合成CTS-EDTA,并將其制備成納米粒,考察其體內(nèi)外螯合促排鍶的效果,為研制新型放射性核素促排藥物提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:通過(guò)N-?;磻?yīng)合成非水溶性CTS-EDTA(高分子量),通過(guò)原子吸收光譜法比較CTS與CTS-EDTA螯合Sr2+的能力;通過(guò)強(qiáng)堿洗脫法提高殼聚糖的脫乙酰度,再通過(guò)60Coγ輻射降解法降低殼聚糖的分子量,為制備納米型水溶性CTS-EDTA(低分子量)作準(zhǔn)備;通過(guò)離子交聯(lián)法制備CTS-EDTA納米
2、粒,并利用CTS-EDTA納米粒上殘余的氨基與異硫氰酸熒光素(FITC)反應(yīng)從而制備納米級(jí)CTS-EDTA熒光探針;通過(guò)激光共聚焦掃描動(dòng)態(tài)觀察納米級(jí)CTS-EDTA熒光探針進(jìn)入細(xì)胞的情況;通過(guò)薄層層析分離法比較CTS-EDTA-Nano(CEC-Nano)、CTS-EDTA(CEC)和EDTA-Na2三種材料的體外螯合Sr2+能力;通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)考察CEC-Nano、CEC和EDTA-Na2體內(nèi)促排放射性S9Sr的效果。 結(jié)果:紅
3、外圖譜與核磁氫譜均證實(shí)通過(guò)N-?;磻?yīng)成功合成了CTS-EDTA,體外實(shí)驗(yàn)表明CTS-EDTA螯合Sr2+的效率在10分鐘后可達(dá)到80%以上,而CTS與Control(空白對(duì)照)無(wú)明顯差異。線性電位滴定法測(cè)定經(jīng)強(qiáng)堿洗脫法獲得的殼聚糖的脫乙酰度由原來(lái)的64.79%最終提高到96.65%;經(jīng)過(guò)200kGy照射后,烏式粘度計(jì)測(cè)得殼聚糖的黏均分子量由原來(lái)的1850kDa降至2.5kDa,紅外光譜證實(shí)輻射降解后,殼聚糖主鏈仍保留環(huán)狀結(jié)構(gòu),為制備新
4、型促排藥物奠定了基礎(chǔ)。通過(guò)離子交聯(lián)法制備得到了納米粒子(CEC-Nano),透射電鏡與掃描電鏡證實(shí)其為圓球狀納米粒子,粒度均一,納米激光粒度儀測(cè)得平均粒徑為5.35±0.31nm,PDI=0.385。熒光光譜分析證實(shí)FITC標(biāo)記到CEC-Nano上,并顯示CEC-Nano-FITC的最大激發(fā)波長(zhǎng)、最大發(fā)射波長(zhǎng)與游離態(tài)FITC無(wú)顯著差異。激光共聚焦顯微鏡掃描可見(jiàn)CEC-Nano能夠快速進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),彌散分布于細(xì)胞漿與細(xì)胞核。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)CE
5、C(螯合效率為84.05%)與CEC-Nano(螯合效率為90.50%)對(duì)89Sr2+有較高的螯合能力,并且明顯高于傳統(tǒng)的促排藥物EDTA-Na2(螯合效率為57.24%);體內(nèi)實(shí)驗(yàn)也表明CEC-Nano和CEC對(duì)體內(nèi)污染尤其是沉積到骨骼中的放射性鍶有明顯的促排效果,其主要的排泄途徑是消化道和泌尿系統(tǒng);其促排效率分別達(dá)到了42.52%和37.64%,與傳統(tǒng)的促排藥物EDTA-Na2相比較,有顯著性提高,盡管CEC-Nano和CEC兩者之
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