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1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文溶酶體相關(guān)的小G蛋白R(shí)ab7b負(fù)向調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞Toll樣受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究姓名:王玉珍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專(zhuān)業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:曹雪濤20060501浙江人學(xué)博士學(xué)位論文 R a b 7 b 負(fù)向調(diào)控T L R s 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)溶酶體相關(guān)的小G 蛋白I b b 7 b 負(fù)向調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞T o U 樣受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究中文摘要T o l l 樣受體f r o l l —l i k cr e c c p t o r s ,T
2、U t s ) 是一類(lèi)重要的模式識(shí)別受體( P R R s ) ,通過(guò)識(shí)別病原微生物特定的病原體相關(guān)分子模式( P a t h o g e n —a s s o c i a t e d m o l e c u l a rp a t t e r n s ,P A M P s ) 啟動(dòng)天然免疫應(yīng)答。T 0 1 1 蛋白最早發(fā)現(xiàn)在調(diào)控果蠅的胚胎發(fā)育過(guò)程中起重要作用。目前,在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中相繼發(fā)現(xiàn)并克隆了1 1 種T L R 分子。它們通過(guò)選擇
3、性識(shí)別病原體中特定的分子結(jié)構(gòu),活化機(jī)體免疫細(xì)胞,以抵抗病原菌的入侵。然而,T U t s 的過(guò)度活化反而產(chǎn)生有害的結(jié)果,可導(dǎo)致各種炎癥性疾病和自身免疫病,如內(nèi)毒素休克和類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。因此,1 r I 且s 的活化及其信號(hào)途徑必需受到嚴(yán)密的調(diào)控。R a b 7 定位于溶酶體,調(diào)控蛋白從早期內(nèi)體到晚期內(nèi)體或晚期內(nèi)體到溶酶體的轉(zhuǎn)運(yùn)。近年來(lái)的研究表明,R a b 7 參與多種受體的轉(zhuǎn)運(yùn)及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程。R a b 7 b是我們自主克隆到的一個(gè)新
4、的小G 蛋白,與R a b 7 高度同源,也定位于溶酶體,特異性地表達(dá)在單核細(xì)胞系。T L R s 主要分布在單核細(xì)胞如巨噬細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞。我們?cè)O(shè)想R a b 7 b 可能參與T u t s 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在本課題中,我們研究了小G蛋白m R a b 7 b 在巨噬細(xì)胞1 1 L R s 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的調(diào)控作用。一、小G 蛋白R(shí) a b 7 b 的小鼠同源物m R a b 7 b 的鑒定和序列分析R a b 7 b 是通過(guò)大規(guī)模測(cè)序從人樹(shù)
5、突狀細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的小G 蛋白( G e n B a n k 登陸號(hào)為A Y 0 9 4 5 9 6 ) 。R a b 7 b 的c D N A 包含一個(gè)6 0 0 b p 的開(kāi)放讀碼框( 1 7 8 .7 7 7 b p ) ,編碼一個(gè)由1 9 9 個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)。在本實(shí)驗(yàn)中,我們搜索到一個(gè)登陸號(hào)為N M 一1 4 5 5 0 9 的克隆。該基因與R a b 7 b 相似性達(dá)9 2 %,同樣編碼‘個(gè)1 9 9 個(gè)氨基酸的蛋白
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