應(yīng)用代謝組學(xué)策略研究普洱茶及其對人體代謝的影響.pdf

1、普洱茶一般指以符合普洱茶產(chǎn)地環(huán)境條件的云南大葉種曬青茶[Camellia sinensis(Linn.) var. assamica(Masters) Kitamura]為原料,經(jīng)特殊后發(fā)酵加工工藝生產(chǎn)而成的具有特定品質(zhì)特征的茶葉。普洱茶具有干茶色澤褐紅、條索肥壯重實、耐貯耐泡,茶湯紅濃明亮、陳香顯著、滋味濃醇回甘,葉底褐色柔軟的特點。普洱茶被認為具有消食減肥、降血脂等保健功能。隨著這些保健功能被現(xiàn)代科學(xué)證實,普洱茶日益受到現(xiàn)代人青睞,

2、除了我國、東南亞等有飲用普洱茶傳統(tǒng)的地區(qū),韓國、日本、德國、法國等國家對普洱茶的消費量也不斷增加。目前對普洱茶的研究工作大多是圍繞其化學(xué)成分的提取分離、微生物學(xué)過程,及其對某一藥理動物模型的作用進行的,而對普洱茶的整體化學(xué)特征及其對人體的系統(tǒng)性作用的研究不足?，F(xiàn)有研究沒有涉及普洱茶與其它茶葉種類的化學(xué)成分區(qū)別,以及決定普洱茶品質(zhì)、功效、口感與視覺的成分,造成其功效評價缺乏堅實的理論基礎(chǔ);另一方面,機體在攝入普洱茶后產(chǎn)生的效應(yīng)也是一個系統(tǒng)

3、反應(yīng),涉及到生物體的各個生理過程,影響眾多代謝通路,僅依靠幾個指標遠不能反映其全貌。基于上述問題,我們希望采用一種連續(xù)動態(tài)的系統(tǒng)性研究方法來評價普洱茶的內(nèi)在品質(zhì),探討其與其它茶類的區(qū)別,并評價其對人體代謝的整體效應(yīng)。代謝組學(xué)又稱代謝物組學(xué),是研究機體代謝產(chǎn)物譜變化的一種新的系統(tǒng)方法。作為一種“組學(xué)”科學(xué),它借助高通量、高靈敏度與高精確度的現(xiàn)代分析技術(shù),分析細胞、組織和其它生物樣本如血液或尿液中內(nèi)源性代謝物整體組成并通過其復(fù)雜的、動態(tài)的變

4、化來辯識和解析被研究對象的生理病理狀態(tài)。代謝物組是蛋白質(zhì)組、轉(zhuǎn)錄組和基因組總體表達的結(jié)果,直接反映組織的生化狀態(tài),能夠較靈敏地刻畫生命體生理病理狀態(tài)的變化,對于闡明生命復(fù)雜系統(tǒng)具有極為重要的意義。其最主要的特征就是高通量的實驗和大規(guī)模的計算,從系統(tǒng)生物學(xué)的角度出發(fā),全面地綜合地考察機體代謝的變化。因此本論文建立了代謝組學(xué)方法評價和研究普洱茶及其對人體代謝的影響,主要內(nèi)容如下:1.建立快速、高效的UPLC/Q-TOF-MS分析方法測定不同

5、種類茶葉,以及不同品種、產(chǎn)地、年份的普洱茶的整體化學(xué)成分。經(jīng)過優(yōu)化液相及質(zhì)譜的測定條件,本分析方法的專屬性、線性范圍、回收率、日內(nèi)日間精密度和穩(wěn)定性均符合茶類樣本的測定要求。采用該方法測定了綠茶、紅茶及普洱茶,結(jié)合多、單維數(shù)據(jù)分析后發(fā)現(xiàn)普洱茶的化學(xué)成分與紅茶、綠茶有顯著差異,不同品種、產(chǎn)地、年份的普洱茶的化學(xué)成分有顯著差異。2.建立普洱茶對人體代謝影響的代謝組學(xué)評價方法,采用UPLC/Q-TOF-MS測定健康志愿者飲用普洱茶前后的尿樣,

6、得到尿中小分子代謝物的指紋圖譜,結(jié)合模式識別(PCA和PLS-DA)等多維統(tǒng)計分析方法,峰響應(yīng)信號的主成分分析圖上顯示飲用普洱茶前后健康志愿者尿液內(nèi)源性代謝物產(chǎn)生明顯分離,并持續(xù)到停止飲用兩周后。采用多維與單維統(tǒng)計結(jié)合的方法,找到與飲用普洱茶前后分組相關(guān)的物質(zhì),發(fā)現(xiàn)其中部分代謝物如肌糖、肉豆蔻酸、5-羥色氨、4-甲氧基苯酸、肌氨酸酐、3-氯酪氨酸、酪氨等物質(zhì)的相對含量產(chǎn)生顯著變化。從這些變化可推測機體系統(tǒng)對普洱茶化學(xué)成分的應(yīng)答以及攝入普