重組人促紅細(xì)胞生成素對(duì)慢性腦缺血大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及凋亡相關(guān)蛋白P53和Bcl-2表達(dá)的影響.pdf

1、目的：1.觀察經(jīng)鼻腔給予重組人促紅細(xì)胞生成素（rhEPO）對(duì)慢性腦缺血大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及凋亡相關(guān)蛋白P53和Bcl-2表達(dá)的影響；2.探討rhEPO的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制，為臨床上應(yīng)用rhEPO提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：16只健康雄性SD大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈（2VO）結(jié)扎，建立永久性慢性腦缺血模型，將其隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。模型建立3天后，實(shí)驗(yàn)組每7天經(jīng)鼻腔給予150U/125μlrhEPO；對(duì)照組于同一時(shí)間鼻腔給予等量的生理鹽水。8W后應(yīng)

2、用Morris水迷宮觀測(cè)兩組大鼠的運(yùn)動(dòng)及空間學(xué)習(xí)記憶能力。采用HE染色，觀察大腦皮層及海馬CA1區(qū)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的變化,并用圖像分析軟件統(tǒng)計(jì)大腦皮層厚度及神經(jīng)元數(shù)目。用免疫組化法檢測(cè)P53及Bcl-2蛋白的表達(dá)水平。采用TUNEL染色檢測(cè)凋亡細(xì)胞數(shù)。
　　結(jié)果：①行為學(xué)測(cè)試結(jié)果顯示2VO+rhEPO組平均逃避潛伏期及穿越平臺(tái)次數(shù)均較2VO+saline組有所改善（P＜0.01）。②HE染色提示，與rhEPO干預(yù)組相比，生理鹽水處理組

3、大鼠皮層及海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元數(shù)目減少，胞體萎縮、核固縮且皮層厚度變薄，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。③免疫組化結(jié)果顯示：P53與Bcl-2呈明顯負(fù)相關(guān)。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組Bcl-2的表達(dá)增加(P＜0.01)，P53平均灰度值增加(P＜0.01)。④TUNEL染色結(jié)果顯示：對(duì)照組凋亡細(xì)胞數(shù)較治療組顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　結(jié)論：rhEPO能改善慢性腦缺血大鼠運(yùn)動(dòng)、記憶及空間定向能力，對(duì)腦的保護(hù)作用機(jī)