OX-42、HMGB1在Wistar大鼠血管性癡呆模型中海馬區(qū)的表達(dá)及丁苯酞干預(yù)的研究.pdf

1、目的:
　　 檢測Wistar大鼠血管性癡呆模型中小膠質(zhì)細(xì)胞表面補(bǔ)體Ⅲ型受體OX-42、高遷移率族蛋白B-1(High Mobility Group Box1，HMGB1)在海馬組織中的動(dòng)態(tài)變化，分析二者之間可能的關(guān)系，探討其在血管性癡呆中的作用。研究丁苯酞對Wistar大鼠血管性癡呆模型中OX-42、HMGB1的影響，闡明丁苯酞可能的機(jī)制。
　　 方法:
　　 將250g-300g健康雄性Wistar大鼠88只

2、，隨機(jī)分為四組:正常對照組、假手術(shù)組、VD模型組、藥物干預(yù)組，其中每組又分為4個(gè)亞組:3天組、1周組、2周組、4周組。應(yīng)用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久結(jié)扎術(shù)(2-VO)建立Wistar大鼠血管性癡呆模型。造模后第24天利用水迷宮試驗(yàn)對大鼠分別進(jìn)行學(xué)習(xí)和記憶成績測試，并觀察各組大鼠行為學(xué)差異。應(yīng)用HE染色法觀察各組大鼠海馬組織病理學(xué)變化情況;應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測OX-42、HMGB1的陽性細(xì)胞表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化;應(yīng)用RT-PCR方法檢測標(biāo)本中OX-

3、42mRNA、HMGB1mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.大鼠學(xué)習(xí)和記憶成績測定結(jié)果:與正常組及假手術(shù)組比較，VD模型組和藥物干預(yù)組的逃避潛伏期明顯延長，穿越平臺(tái)的次數(shù)明顯減少(P＜0.05);與VD模型組比較，藥物干預(yù)組的逃避潛伏期縮短，穿越平臺(tái)的次數(shù)增多，兩者之間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2.HE染色:
　　 光鏡下觀察大鼠海馬組織，正常組和假手術(shù)組海馬區(qū)神經(jīng)元結(jié)構(gòu)和形態(tài)

4、正常，細(xì)胞排列規(guī)則，細(xì)胞核大而圓，胞漿豐富;VD模型3天組可見大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞出現(xiàn)缺血性改變，可見少量的膠質(zhì)細(xì)胞增生，部分神經(jīng)元輕度腫脹;VD模型1周組可見膠質(zhì)細(xì)胞中度增生，神經(jīng)元細(xì)胞體積縮小，部分腫脹、溶解，胞核不規(guī)則;VD模型2周組可見膠質(zhì)細(xì)胞大量增生，正常形態(tài)的細(xì)胞數(shù)明顯減少，神經(jīng)元細(xì)胞開始出現(xiàn)凋亡，胞體變形、縮小，胞核固縮;VD模型4周組可見大量神經(jīng)元凋亡，胞漿濃縮，胞核碎裂、溶解;藥物干預(yù)組各個(gè)相同時(shí)間點(diǎn)與VD模型組比較，

5、海馬神經(jīng)元細(xì)胞變性、壞死明顯減輕。
　　 3.免疫組織化學(xué)結(jié)果:
　　 (1)正常組和假手術(shù)組海馬區(qū)僅見少量OX-42陽性細(xì)胞表達(dá)，兩組之間沒有顯著性差異(P＞0.05);在VD模型組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)中OX-42陽性細(xì)胞表達(dá)均明顯增加，1周時(shí)達(dá)到高峰，與正常組及假手術(shù)組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);藥物干預(yù)組各個(gè)相同時(shí)間點(diǎn)的陽性細(xì)胞表達(dá)均比VD模型組的下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 (2)在

6、正常組和假手術(shù)組中海馬區(qū)HMGB1陽性細(xì)胞表達(dá)很少，兩組之間比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);在VD模型組各時(shí)間點(diǎn)中HMGB1陽性細(xì)胞的表達(dá)與正常組、假手術(shù)組比較均升高，在2周時(shí)達(dá)到高峰，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）;藥物干預(yù)組各個(gè)相同時(shí)間點(diǎn)中HMGB1陽性細(xì)胞的表達(dá)與VD模型組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 4.RT-PCR檢測結(jié)果:
　　 (1)正常組及假手術(shù)組OX-42mRNA表達(dá)水平較低

7、，兩組之間比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);VD模型組較正常組及假手術(shù)組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);OX-42mRNA的表達(dá)在1周組達(dá)到高峰;藥物干預(yù)組較VD模型組各個(gè)相同時(shí)間點(diǎn)的OX-42mRNA表達(dá)均明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 (2)正常組及假手術(shù)組可見少量HMGB1mRNA的表達(dá)，兩組之間比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;VD模型組較正常組及假手術(shù)組均明顯升高，差異均有統(tǒng)