組織工程技術(shù)和生物反應(yīng)器結(jié)合體外構(gòu)建尿路肌性管腔的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　探討犬脂肪干細(xì)胞(Adipose-derived stem cells ADSCs)的成肌誘導(dǎo)，并將脂肪干細(xì)胞與聚羥基乙酸（polyglycolic acid PGA）材料復(fù)合，研究應(yīng)用生物反應(yīng)器體外構(gòu)建組織工程化尿路肌性管腔的可行性。
　　方法：
　　脂肪干細(xì)胞通過(guò)酶消化法獲取，在體外培養(yǎng)和擴(kuò)增后，應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面抗原，將脂肪干細(xì)胞應(yīng)用成肌誘導(dǎo)培養(yǎng)液誘導(dǎo)4周，行細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)，同時(shí)將脂肪干細(xì)

2、胞接種于PGA上，構(gòu)建細(xì)胞-材料復(fù)合物，體外培養(yǎng)1周后，將其置于生物反應(yīng)器內(nèi)培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組予以動(dòng)態(tài)力學(xué)刺激培養(yǎng)；對(duì)照組為靜態(tài)培養(yǎng)，先采用基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)3周，而后用成肌誘導(dǎo)培養(yǎng)液誘導(dǎo)4周，行大體觀察及組織學(xué)檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果CD90、CD44、CD105表達(dá)均為陽(yáng)性，分別為99.42％、98.12%、93.27%；CD34、CD45表達(dá)均為陰性分別為4.92%和0.38%，脂肪干細(xì)胞誘導(dǎo)4周后，表達(dá)結(jié)蛋白