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文檔簡介
1、目的:觀察重組人骨形成蛋白2(rhBMP-2)對人肝癌SMMC-7721細胞遷移和侵襲能力的影響;及rhBMP-2對人肝癌SMMC-7721細胞合成間質(zhì)膠原酶(MMP-1)的影響。
方法:
1、將人肝癌SMMC-7721細胞分為4組,各組分別用含不同濃度的rhBMP-2(0、200、400、600μg/L)培養(yǎng)12、24、48h后,用細胞劃痕法檢測細胞體外遷移能力,Transwell小室測定法檢測細胞體外侵襲
2、能力。
2、將人肝癌SMMC-7721細胞分為3組,各組分別用含不同濃度的rhBMP-2(0、200、500μg/L)培養(yǎng)48h后,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測SMMC-7721細胞MMP-1 mRNA的表達,采用western blot法檢測MMP-1蛋白的表達。
結(jié)果:
1、rhBMP-2200、400、600μg/L組12、24、48h SMMC-7721細胞遷移率與對照組
3、比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05),且rhBMP-2200、400、600μg/L組各組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。rhBMP-2200、400、600μg/L組12、24、48hSMMC-7721細胞穿膜數(shù)與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),rhBMP-2200、400、600μg/L組各組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。rhBMP-2200、400、600μg/L組12、24h SMMC-7721細
4、胞遷移率、細胞穿膜數(shù)與48h比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),濃度與時間無交互作用。
2、rhBMP-2500μg/L組MMP-1 mRNA及蛋白表達最高,rhBMP-2 Oμg/L組mRNA及蛋白表達最低,rhBMP-2200μg/L組mRNA及蛋白表達介于二者之間,各組問差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:BMP-2可增加人肝癌SMMC-7721細胞的侵襲和遷移能力,且呈時間-濃度依賴性;B
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