皮膚創(chuàng)面組織血管緊張素Ⅱ及其受體表達的研究.pdf

1、目的：通過檢測大鼠全層皮膚缺損創(chuàng)面愈合過程中血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ,Ang Ⅱ)、血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)換酶(Angiotensin Ⅰ coriverting enzyme，ACE)及血管緊張素Ⅱ受體AT1和AT2表達的時相性變化和組織細胞定位，闡明AngⅡ、ACE及AT1和AT2在皮膚創(chuàng)面愈合過程中的表達規(guī)律。 方法：建立大鼠背部全層皮膚缺損模型，采用HE染色觀察不同時間點皮膚組織結(jié)構(gòu)及特征，用免疫組織化學(xué)方法檢測皮

2、膚創(chuàng)面愈合過程中AngⅡ、ACE、AT1及AT2表達的時相性變化及組織細胞定位。采用RT-PCR法檢測ACE、AT1及AT2基因表達水平的變化。 結(jié)果： 1.大體觀察：創(chuàng)面面積隨傷后時間延長而逐漸縮小，到傷后21d幾乎所有創(chuàng)面完全愈合。 2.光鏡下觀察傷后不同時間點皮膚組織結(jié)構(gòu)及特征，結(jié)果如下：傷后第3d有少量肉芽組織形成；到傷后第7d肉芽組織增厚，新生毛細血管豐富，有少量炎性細胞，成纖維細胞較多；傷后第14d可

3、見大量的肉芽組織生長，膠原沉積增多，上皮覆蓋增加，炎性細胞減少。傷后第21d所有創(chuàng)面均被新生上皮覆蓋，創(chuàng)面已經(jīng)完全愈合，炎性細胞和新生血管減少。 3.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，大鼠正常皮膚有．AngⅡ、ACE、AT1、AT2的表達，但表達量少。在正常皮膚AngⅡ主要定位于表皮及毛囊外根鞘，而ACE、AT1、AT2等定位于毛囊外根鞘和皮脂腺，表皮層未見陽性染色。在大鼠創(chuàng)面愈合過程中AngⅡ主要在新生血管壁和新生上皮有表達，傷后3d

4、其表達減弱，傷后7d恢復(fù)到正常水平，傷后14d達高峰，傷后21d創(chuàng)面幾乎完全愈合，AngⅡ表達恢復(fù)到正常水平。在創(chuàng)面愈合過程中ACE、AT1、AT2除了新生血管壁以外，其余部位未見陽性染色，在此過程中三者表達變化基本一致，即傷后7天開始表達明顯增加，傷后14d達高峰，傷后21d恢復(fù)到接近正常水平。 4.RT-PCR結(jié)果顯示在正常皮膚和損傷后的皮膚組織中均有AT1、AT2及ACE基因mRNA表達。在傷后3dAT1、AT2及ACE基

5、因表達逐漸增加，傷后14d達高峰，與正常皮膚中的表達相比差異有顯著性(P<0.05)。傷后21d創(chuàng)面幾乎完全愈合，AT2及ACE基因表達明顯減弱，但AT1表達仍高于正常皮膚表達。 結(jié)論： 1.大鼠皮膚組織損傷愈合過程中AngⅡ、AT1、AT2及ACE表達規(guī)律為：蛋白水平上，傷后3d表達減弱，傷后7d恢復(fù)到正常水平或開始增加，第14d達峰值，第21d恢復(fù)到正常水平；基因水平上，傷后3d開始增加，傷后14d達峰值，第21d恢