血管生成素及其受體在腹膜透析腹膜組織中的表達(dá).pdf

1、目的:眾所周知,長期的腹膜透析會導(dǎo)致腹膜功能逐漸出現(xiàn)衰退,最終導(dǎo)致超濾衰竭,使得尿毒癥患者最終不得已退出腹膜透析。新近研究發(fā)現(xiàn),腹膜發(fā)生血管新生是患者腹膜功能衰退的主要原因之一。本實(shí)驗旨在通過建立尿毒癥腹膜透析大鼠模型,了解其腹膜組織血管生成素及其受體的表達(dá)情況以及引起血管生成素及其受體變化的影響因素,以探討腹膜新生血管的發(fā)生機(jī)制。
　　 方法:選取健康SD雄性大鼠30只,體重約為180-220g,均購于江西省中醫(yī)院醫(yī)學(xué)動物實(shí)驗

2、中心。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周以后,隨機(jī)選取其中22只大鼠建立經(jīng)典的5/6腎切除術(shù)尿毒癥模型,造模四周后采集大鼠尾靜脈測血肌酐、尿素氮值,腎切除術(shù)后4周,造模成功的大鼠腹腔內(nèi)予植入自制的腹透管,隨機(jī)分為尿毒癥組(NS組)及腹透組(PD組)。尿毒癥組每日給予20ml生理鹽水腹腔灌注,腹透組則每日給予20ml4.25％百特腹透液腹腔灌注,共持續(xù)六周。余下未造模的8只大鼠擬為對照組(C組),行假手術(shù)且不予任何液體灌注。所有的大鼠均正常飲食飲水,灌液六周

3、后取大鼠腹膜組織,觀察腹膜血管新生情況；免疫組織化學(xué)染色及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(reverse transcription-polymerise chainreaction,RT-PCR)檢測腹膜組織血管生成素及其受體的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:(1)實(shí)驗表明PD組相對其他兩組新生血管數(shù)顯著增多,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；NS組新生血管數(shù)較C組為多,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(2)免疫組化顯示各組大鼠血管生

4、成素1(Angpt-1)陽性細(xì)胞數(shù)比較P>0.05,無統(tǒng)計學(xué)意義；血管生成素2(Angpt-2)及其受體2(Tie-2)陽性細(xì)胞數(shù)PD組相對于C組和NS組顯著增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；NS組較C組亦有增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(3)RT-PCR顯示Angpt-1mRNA條帶半定量分析結(jié)果在三組間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；PD組Angpt-2 mRNA和Tie-2mRNA條帶深于其他兩組,半定量分析差異

5、具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；NS組Angpt-2 mRNA和Tie-2 mRNA半定量分析結(jié)果高于C組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(4)Angpt-2陽性細(xì)胞數(shù)與腹膜新生血管數(shù)之間存在直線正相關(guān)關(guān)系(P<0.05,R<0.855)；Angpt-2 mRNA半定量分析結(jié)果與腹膜新生血管數(shù)之間辦呈直線正相關(guān)關(guān)系(P<0.05,R<0.742)。
　　 結(jié)論:尿毒癥狀態(tài)及腹膜透析液均會上調(diào)腹膜血管生成素-2及其受體的表達(dá)