肝動脈化療栓塞后VEGFR-2和PLGF濃度變化及對肝癌預后作用的初步探討.pdf

1、背景和目的:
　　 原發(fā)性肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是世界上第五大惡性腫瘤，是導致死亡的第三大惡性腫瘤。在我國肝癌是僅次于肺癌的惡性腫瘤，其發(fā)病率占全國惡性腫瘤發(fā)病的10.03％，死亡率占全國惡性腫瘤死亡的14.56％。目前臨床上針對肝癌患者的主要治療方式有手術切除、肝移植術、介入治療、分子靶向藥物等。手術治療是原發(fā)性肝癌最主要的治療方式之一，包括肝切除術及肝移植術，由于該病起病隱匿，多

2、數患者發(fā)現較晚或合并肝硬化，肝癌患者可以行手術治療的比例約為50％。伴隨著科技的發(fā)展，以肝動脈化療栓塞術(transcatheter arterial chemoembolization，TACE)為主的微創(chuàng)介入治療技術的療效得到了肯定。TACE是目前不能接受手術切除的原發(fā)性肝癌患者的首選治療方式之一。然而，TACE并不能使腫瘤病灶全部壞死，尤其是對多處肝內轉移病灶、腫瘤包膜內外浸潤等有一定限度，殘留腫瘤通過側支循環(huán)的建立，常會導致術后

3、復發(fā)及肝內轉移，這也是影響其遠期療效的主要原因。
　　 肝癌是一種富血管的惡性腫瘤，血管生成在腫瘤生長、侵襲及轉移中起著重要作用。血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是目前已知最重要的促血管生成的關鍵因子之一。VEGF家族成員包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D和胎盤生長因子(placenta growth factor, PLGF)。目前已發(fā)現

4、的VEGF受體有3種，即血管內皮生長因子受體-1(vascularendothelial growth factor receptor-1，VEGFR-1/Flt-1），血管內皮生長因子受體-2（vascular endothelial growth factor receptor-2，VEGFR-2/Flk-1），血管內皮生長因子受體-3（vascular endothelial growth factor receptor-3，VE

5、GFR-3/Flk-4）。PLGF具有促進滋養(yǎng)層細胞的增殖、促進血管的生成、刺激內皮細胞的生長和遷移，及促進擴增、促腫瘤生長及增加通透性等作用。PLGF在誘導血管生成和維持血管結構中起著十分重要的作用。VEGFR-2所介導的VEGF信號傳導對血管內皮細胞的刺激作用最強，能刺激內皮細胞的增殖和遷移。VEGFR-2在腫瘤血管生成和增加血管通透性中起著重要的作用。PLGF與VEGFR-2已被證實與肝癌、非小細胞肺癌、大腸癌、胃癌等多種腫瘤的發(fā)

6、生發(fā)展及預后相關。
　　 相對于病理組織及活檢，檢測外周血清或血漿具有極大的優(yōu)勢:容易取材、重復性好、檢測方便、且能實時反映療效。根據巴塞羅那(barcelona clinicliver cancer，BCLC)分期系統，針對中晚期患者只能采用如肝動脈化療栓塞等介入治療及靶向藥物治療，因此這類患者如欲采用組織進行檢測并不符合實際，而采用外周血具有臨床可操作性。目前尚沒有有效的生物學指標可以早期檢測出肝癌及判斷治療效果，因此我們需

7、要從機制方面及分子特征方面挑選生物學標記物，為肝癌患者的診斷、治療及預后提高可靠而有效的指標，促進肝癌的個體化治療。
　　 因此本研究通過采用ELISA方法分別檢測肝癌患者、肝硬化及正常人血漿中PLGF及血清VEGFR-2的濃度，分析HCC患者行TACE前后PLGF及VEGFR-2的變化，血漿PLGF及血清VEGFR-2濃度與肝癌患者臨床病理資料的相關性，旨在①、探討肝癌、肝硬化患者、正常人血漿PLGF及血清VEGFR-2濃度的

8、差異，分析PLGF及VEGFR-2能否作為肝癌的診斷指標;②、探討血漿PLGF及血清VEGFR-2濃度與肝癌患者的臨床病理資料的相關性，分析血漿PLGF及血清VEGFR-2與肝癌患者的預后關系，判定PLGF及VEGFR-2能否作為肝癌患者的預后指標。
　　 方法:
　　 1、選取2008年10月-2012年4月在廣東省人民醫(yī)院行TACE治療的43例HCC患者，同時選取肝硬化及健康成年人各25例作為對照組。采用酶聯免疫吸附

9、實驗(ELISA)方法檢測肝癌患者、肝硬化患者及健康成年人血漿PLGF濃度，同時分析各組的差異;檢測肝癌患者行TACE術前1-3天及術后4周血漿PLGF濃度，并分析差異;分析術前血漿PLGF濃度與臨床病理特征和預后的關系，判定血漿PLGF濃度能否作為反應肝癌患者的預后指標。
　　 2、選取2008年10月-2012年4月在廣東省人民醫(yī)院行TACE治療的69例HCC患者，同時選取肝硬化及健康成年人各25例作為對照組。采用酶聯免疫吸

10、附實驗(ELISA)方法檢測肝癌患者、肝硬化患者及健康成年人血清中的VEGFR-2濃度，同時分析各組的差異;檢測肝癌患者行TACE術前1-3天及術后4周血清VEGFR-2濃度，并分析差異;分析術前血清VEGFR-2濃度與臨床病理特征和預后的關系，判定血清VEGFR-2濃度能否作為反應肝癌患者的預后指標。
　　 3、所有數據均采用SPSS13.0軟件進行處理。符合正態(tài)性分布和方差齊性的計量資料的均數比較采用t檢驗或多組方差分析，不

11、符合正態(tài)分布的計量資料均數的比較采用非參數秩和檢驗;兩變量的相關性分析采用Pearson相關分析;采用Kaplan-Meier法進行兩組間的生存分析;用log-rank檢驗進行組間生存率比較;用Cox比例風險回歸模型進行探索性多變量分析，確定基線特征對患者總生存期的影響。P＜0.05被認為有統計學意義。
　　 結果:
　　 1、PLGF的相關統計結果
　　 1.125例健康成年人血漿PLGF濃度為(286.8±6

12、1.8) pg/ml，25例肝硬化患者血漿PLGF濃度為(471.3±101.1)pg/ml，43例HCC患者血漿PLGF濃度為(641.0±216.2) pg/ml。HCC組與肝硬化組之間、與健康人組之間，差異有統計學意義（P值均=0.000）。肝硬化組與健康人組之間，差異也具有顯著性（P=0.000）;血漿PLGF濃度在BCLC分期（P=0.031）、腫瘤大?。≒=0.009）、門脈癌栓（P=0.007）、有無轉移（P=0.046）

13、分組有明顯差別，與其他臨床資料未見明顯差異;
　　 1.2血漿PLGF與血小板計數之間無明顯相關關系(r=0.034，P=0.829);血漿PLGF與甲胎蛋白之間無明顯相關關系(r=0.140，P=0.372);
　　 1.343例HCC患者術前1-3天血漿PLGF濃度(641.0±216.2) pg/ml，術后1個月血漿PLGF濃度(703.4±280.7) pg/ml，兩者相比差異有顯著性意義（P=0.001）;

14、r>　　 1.4按術前血漿PLGF濃度均數641.0pg/ml，將其分為術前濃度高組(＞641.0pg/ml)與術前濃度低組(＜641.0 pg/ml)，兩組總生存時間及無疾病進展時間存在統計學差異(P=0.021，P=0.031)。
　　 1.5將有無轉移、有無門脈癌栓、腫瘤數目、腫瘤大小、肝功能Child-Pugh評分、術前血漿PLGF濃度這六個變量納入COX回歸中，先進行單變量分析，得出具有統計學意義的變量，有無轉移（P

15、=0.022）、有無門脈癌栓(P=0.004)、腫瘤大小(P=0.003)、肝功能Child-Pugh評分(P=0.216)再進行多變量分析，最終得出腫瘤大小(P=0.021)、術前血漿PLGF濃度(P=0.023)是影響HCC患者OS的獨立預后因素。
　　 2、VEGFR-2的相關統計結果
　　 2.125例健康成年人血清VEGFR-2濃度為(2913.8±658.8) pg/ml，25例肝硬化患者血清VEGFR-2濃

16、度為(5012.5±1130.3)pg/ml，69例HCC患者血清VEGFR-2濃度為(8709.2±6509.5) pg/ml。HCC組與肝硬化組之間、與健康人組之間，差異有統計學意義（P值均=0.000）。肝硬化組與健康人組之間，差異也具有顯著性(P=0.000);
　　 2.2血清VEGFR-2濃度在有無肝硬化組分組有差異(P=0.021)，與其他臨床基線資料未發(fā)現明顯差異;
　　 2.3 HCC患者行TACE術后

17、血清VEGFR-2濃度(10557.9±7007.2) ng/l較術前(8709.2±6509.5) ng/l升高，且具有統計學差異(P=0.045);
　　 2.4按術前血清VEGFR-2濃度平均數8709.2 ng/l分組，術前血清VEGFR-2高濃度HCC患者其總生存時間及無疾病進展時間較血清VEGFR-2低濃度的患者較短(P=0.001,P=0.031);
　　 2.5將有無轉移、有無門脈癌栓、腫瘤數目、腫瘤大小

18、、肝功能Child-Pugh評分、術前血清VEGFR-2濃度這六個變量納入COX回歸中，先進行單變量分析，得出具有統計學意義的變量，再進行多變量分析，最終得出肝功能Child-Pugh評分(P=0.012)、術前血清VEGFR-2濃度(P＜0.000)是影響HCC患者OS的獨立預后因素。
　　 結論:
　　 1、血漿PLGF及血清VEGFR2濃度均顯著高于各自對照組的肝硬化患者及健康成年人的血漿PLGF及血清VEGFR2

19、濃度，推測血漿PLGF及血清VEGFR2濃度可能是獨立于甲胎蛋白的早期診斷標記物。
　　 2、血清VEGFR2濃度僅在肝硬化分組有差異，而血漿PLGF濃度在BCLC分期、腫瘤大小、門脈癌栓、有無轉移分組均有明顯差別，提示PLGF可能與肝癌的轉移及侵襲性關系更為密切。
　　 3、肝癌患者行TACE術后血漿PLGF濃度及血清VEGFR-2濃度較術前明顯升高，可能是TACE術后造成的缺氧環(huán)境刺激了PLGF及VEGFR-2的分泌