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1、目的:對(duì)廣西產(chǎn)地錢(qián)進(jìn)行產(chǎn)地調(diào)查,并對(duì)3種廣西產(chǎn)地錢(qián)的原植物進(jìn)行鑒別;探討拳卷地錢(qián)總黃酮對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用,并研究其在乙型肝炎病毒(HBV)基因轉(zhuǎn)染的人肝癌細(xì)胞系2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)中,對(duì)細(xì)胞的毒性及其分泌的表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的抑制作用。方法:(1)對(duì)廣西產(chǎn)地錢(qián)進(jìn)行產(chǎn)地調(diào)查,樣品采集;觀察3種廣西地錢(qián)的原植物形態(tài),并對(duì)其孢芽杯進(jìn)行鑒別。(2)采用四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的模型,觀察拳卷地錢(qián)總黃酮對(duì)小鼠肝
2、功能指標(biāo)ALT(丙氨酸轉(zhuǎn)胺基酶)和AST(天門(mén)冬胺酸轉(zhuǎn)胺基酶)水平的影響。(3)藥物對(duì)細(xì)胞的毒性實(shí)驗(yàn):在接種2.2.15細(xì)胞后24小時(shí),加2倍稀釋的5個(gè)稀釋度藥液濃度500、250、125、62.5、31.3μg·ml-1,4天換一次藥液,維持8天,用顯微鏡觀察細(xì)胞病變;(4)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn):在無(wú)毒濃度下,以2倍稀釋藥液稀釋為62.5、31.25、15.62、7.81、3.9μg·ml-15個(gè)濃度,37℃5%CO2培養(yǎng),每4天收集培養(yǎng)液,換
3、原濃度藥液培養(yǎng),并于第8天時(shí)收集培養(yǎng)液,同時(shí)測(cè)定HBsAg和HBeAg。結(jié)果:(1)初步整理出廣西產(chǎn)地錢(qián)的種類、分布和生境特征;3種廣西地錢(qián)的原植物形態(tài)及孢芽杯的性狀與顯微鑒別,顯示了種類之間的差異。(2)拳卷地錢(qián)總黃酮有效地抑制四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的血清ALT和AST升高。(3)細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,拳卷地錢(qián)總黃酮對(duì)細(xì)胞的半數(shù)細(xì)胞毒濃度(TC50)為152.37μg·ml-1,最大無(wú)毒濃度(TC0)為31.3μg·ml-1。(4)
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