廣西產(chǎn)地線生藥鑒別及體外抗乙肝病毒實驗研究.pdf

1、目的：①對廣西產(chǎn)地錢進行進行生藥鑒別。②以乙型肝炎病毒(HBV)轉染的細胞株2.2.15細胞為靶細胞，觀察拳卷地錢總黃酮在該細胞系中對細胞的毒性、HBsAg和HBeAg分泌的抑制作用，同時研究并分析拳卷地錢總黃酮對2.2.15細胞HBV-DNA復制的抑制作用。方法：①以薄層色譜法(TLC)和槲皮素、木犀草素等多種黃酮類對照品，對廣西產(chǎn)地錢進行試驗性鑒別。②接種2.2.15細胞24h后，加入拳卷地錢總黃酮培養(yǎng)9天，觀察細胞病變，用噻唑鹽(

2、MTT)比色分析法檢測拳卷地錢總黃酮對2.2.15細胞的毒性。③在無毒的藥物濃度下，將藥物加入2.2.15細胞培養(yǎng)3、6、9天，收集培養(yǎng)液，分別測定HBsAg和HBeAg水平。④將藥物加入2.2.15細胞培養(yǎng)9天，提取細胞的DNA，用HBV-DNA探針作斑點雜交，對斑點進行定量分析。結果：①三種地錢的TLC圖譜有明顯區(qū)別。②拳卷地錢總黃酮對細胞的最大無毒濃度為40μg·ml-1；第3、6、9天時，40μg·ml-1的拳卷地錢總黃酮對2.

3、2.15細胞HBeAg、HBsAg分泌抑制率分別為28.53％、28.68％；36.35％、31.45％；44.68％、48.78％，隨著時間和劑量的增加，拳卷地錢總黃酮對2.2.15細胞HBeAg、HBsAg分泌抑制作用增強，對HBeAg和HBsAg分泌抑制的半數(shù)有效濃度IC50分別為17.11μg·ml-1和17.90μg·ml-1；拳卷地錢總黃酮對HBV-DNA抑制率為31.52％，且呈劑量反應關系。結論：①通過生藥學鑒別研究，該