精氨酸對脂多糖誘發(fā)泌乳奶牛炎性反應(yīng)的緩解作用及其分子機(jī)制.pdf

1、高精料誘發(fā)的奶牛瘤胃酸中毒（SARA）會導(dǎo)致瘤胃異常代謝產(chǎn)物脂多糖(LPS)大量產(chǎn)生并移位至循環(huán)血液，引起機(jī)體炎性反應(yīng)，進(jìn)而影響奶牛健康及牛奶品質(zhì)。本文通過LPS刺激模擬SARA誘發(fā)奶牛炎性反應(yīng)的狀態(tài)，然后采用頸靜脈血插管和體外細(xì)胞試驗(yàn)相結(jié)合的方法研究精氨酸(Arg)對LPS誘發(fā)泌乳奶牛炎性反應(yīng)的緩解作用及其分子機(jī)制，為調(diào)控SARA提供理論方法。研究主要包括兩部分:
　　試驗(yàn)一采用有重復(fù)4×4拉丁方設(shè)計，研究精氨酸對LPS誘發(fā)泌乳

2、奶牛炎性反應(yīng)的緩解作用。選用8頭健康的泌乳中后期荷斯坦奶牛，隨機(jī)分為4組:對照組(Con)、精氨酸組（Arg）、脂多糖組(LPS)、精氨酸+脂多糖組（Arg+ LPS），分別從頸靜脈灌注生理鹽水、18 g/d Arg、0.2μg/kg/d LPS、18 g/d Arg+0.2μg/kg/d LPS。試驗(yàn)分4期進(jìn)行，每期15天(5天灌注期，10天恢復(fù)期)。結(jié)果表明:1）灌注LPS顯著增加了IL-1β、IL-6、TNF-α、脂多糖結(jié)合蛋白(

3、LBP)、白細(xì)胞數(shù)(WBC)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活性(P＜0.05)，補(bǔ)充Arg顯著降低IL-1β含量及iNOS活性(P＜0.05)，IL-6、TNF-α、脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)白細(xì)胞數(shù)(WBC)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量都有降低的趨勢(P＜0.1);2)LPS顯著增加丙二醛(MDA)含量、降低谷胱甘肽過氧化氫酶(GSH-PⅩ)活性及總抗氧化能力(T-AOC)(P＜0.05)，補(bǔ)充精氨酸能緩解

4、這一趨勢，但只有GSH-PⅩ差異顯著(P＜0.05);3)LPS顯著降低了Gly、Arg、Ala、Val、Leu、Ile、Lys、Met、Phe及總游離氨基酸(TFAA)含量(P＜0.05)，補(bǔ)充精氨酸顯著增加了Gly、Leu、Ile、Phe及TFAA含量(P＜0.05)，Arg、Ala、Val、Lys、Met有不同程度的增加，但差異不顯著(P＞0.05);4)灌注LPS顯著降低奶牛干物質(zhì)采食量(DMI)、產(chǎn)奶量、乳脂率及αS1酪蛋白（

5、αS1-CN）、αS2-CN、β-CN及總酪蛋白含量(P＜0.05)，顯著增加乳清蛋白含量及體細(xì)胞數(shù)(SCC)(P＜0.05)，補(bǔ)充精氨酸后DMI、產(chǎn)奶量、乳脂率及總酪蛋白含量顯著增加(P＜0.05)，乳清蛋白含量及體細(xì)胞數(shù)顯著降低(P＜0.05)，其他指標(biāo)都差異不顯著(P＞0.05)。結(jié)果表明精氨酸能在一定程度上緩解及調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)。
　　試驗(yàn)二通過LPS刺激奶牛乳腺上皮細(xì)胞建立炎癥模型，研究精氨酸緩解乳腺細(xì)胞炎性反應(yīng)的分子機(jī)制。

6、將二代奶牛乳腺上皮細(xì)胞分成4組:Con組、Arg組、LPS組、Arg+LPS組，分別用DMEM/F12、10μg/mL精氨酸、100μg/mL LPS、10μg/mL Arg+100μg/mL LPS處理12h。結(jié)果表明:1）精氨酸降低了LPS誘導(dǎo)上升的IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS及NO含量(P＜0.05)。精氨酸能緩解NF-κB的過表達(dá)、上調(diào)mTOR信號通路(P＜0.05)，但不改變TLR4的表達(dá)(P＞0.05);2)精