桑精膠囊及其拆方干預(yù)動物2型糖尿病的效應(yīng)及作用機制.pdf

1、糖尿病一詞描述的是一種多病因的代謝性疾病，特點是慢性高血糖，伴隨因胰島素分泌和/或作用缺陷引起的糖、脂肪和蛋白質(zhì)代謝紊亂。2型糖尿病患者占糖尿病病人總數(shù)的90%左右，其發(fā)病率隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展和生活方式的變化呈逐年上升趨勢，成為僅次于心腦血管病和腫瘤的嚴重威脅人類健康的第三大非傳染性疾病。據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟(International Diabetes Federation，IDF)統(tǒng)計，20世紀90年代全球糖尿病患者約為1.00億人，到

2、了2007年該數(shù)字已經(jīng)迅速增長到2.46億，預(yù)計到2025年全球?qū)⒂?.80億人受到糖尿病的困擾。目前，我國已經(jīng)成為僅次于印度的糖尿病第二大國，患者將近4 000萬人。人口老齡化進程的加速和居民生活方式的改變使得我國的糖尿病患病率、致殘率和死亡率呈現(xiàn)明顯的上升趨勢。
　　 2型糖尿病是一種異質(zhì)性疾病，其發(fā)病中心環(huán)節(jié)是胰島素抵抗（IR）和胰島β細胞功能衰竭。IR是2型糖尿病的主要特征并貫穿2型糖尿病發(fā)生、發(fā)展的始終，但僅有IR不足

3、以導(dǎo)致2型糖尿病。縱向研究表明，顯著高血糖的發(fā)生與胰島β細胞分泌功能下降有關(guān)，β細胞功能缺陷是2型糖尿病發(fā)病的必要條件，胰島β細胞衰竭是其發(fā)展的結(jié)果，也是2型糖尿病病情加重的驅(qū)動力量。早期降低血糖濃度，可逆轉(zhuǎn)胰島β細胞功能減退，使胰島素分泌恢復(fù)正常。因此，加強2型糖尿病發(fā)病機理的研究，針對其病因，尋找既能保護胰島β細胞功能，又能改善IR的藥物，是當前糖尿病治療領(lǐng)域研究的熱點課題。
　　 桑樹是一種優(yōu)良的藥用植物。桑葉、桑椹、桑枝

4、和桑白皮都是傳統(tǒng)的中藥材，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明上述藥材均具有降血糖、調(diào)血脂、抗炎、抗氧化等作用，特別是在對糖尿病及其并發(fā)癥的預(yù)防和治療方面具有藥性平和、作用廣泛和毒副作用小等特點。桑精膠囊系導(dǎo)師的經(jīng)驗方，由桑葉、桑椹、桑枝和桑白皮等藥物組成，臨床上應(yīng)用其治療2型糖尿病療效顯著。本研究旨在探討桑精膠囊及其拆方的抗2型糖尿病的效應(yīng)及作用機制。首先，本研究采用尾靜脈注射小劑量STZ溶液輔以高脂高熱卡飼料喂養(yǎng)的方法復(fù)制出具有肥胖以及葡萄糖和脂質(zhì)代

5、謝紊亂等特征，與人類2型糖尿病相類似的動物模型。在此基礎(chǔ)上，研究了桑精膠囊及其拆方對該模型動物糖脂代謝的影響，并從抗炎、抗氧化和改善胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面探究其可能的作用機制。
　　 本研究發(fā)現(xiàn)，桑精膠囊能有效地降低血糖、提高胰島素敏感性和胰島β細胞基礎(chǔ)狀態(tài)下的分泌功能、糾正血脂紊亂、改善IR。桑精膠囊的抗糖尿病效應(yīng)可能與其有效地提高機體抗氧化能力，保護胰島形態(tài)及功能，調(diào)節(jié)脂肪和骨骼肌組織中胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的相關(guān)蛋白含量及其活

6、性而改善胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。為進一步明確桑精膠囊復(fù)方中治療2型糖尿病的主要作用藥物，闡明其藥物配伍的合理性，本實驗對桑精膠囊進行了拆方研究，觀察比較桑葉、桑椹、桑枝和桑白皮抗大鼠2型糖尿病的效應(yīng)，探討其可能的作用機制。結(jié)果表明，上述諸藥都能降血糖、調(diào)血脂，其作用機制可能與平衡血清促炎細胞因子和抗炎細胞因子水平、提高抗氧化酶活性，改善炎癥，從而保護胰腺組織形態(tài)和功能有關(guān)，但各味藥作用機制不盡相同，各有側(cè)重，以桑葉的作用較為明顯、全面，從一

7、個側(cè)面說明了桑精膠囊復(fù)方配伍的合理性和科學(xué)性。
　　 第一部分：桑精膠囊對小劑量STZ加高脂高熱卡飼料誘導(dǎo)2型糖尿病大鼠糖脂代謝影響的研究
　　 目的：
　　 建立小劑量STZ加高脂高熱卡飼料誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠模型，觀察桑精膠囊對2型糖尿病大鼠葡萄糖和脂質(zhì)代謝的影響，以明確該方治療2型糖尿病的效應(yīng)。
　　 方法：
　　 采用尾靜脈注射小劑量鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ，25m

8、g/kg)加高脂高熱卡飼料喂養(yǎng)的方法建立2型糖尿病大鼠模型，將成模動物隨機分為模型組、二甲雙胍組和桑精膠囊組，另設(shè)正常對照組。藥物干預(yù)治療8周后，各組動物進行口服糖耐量試驗(Oral glucose tolerance test，OGTT)并檢測各組動物體重變化、空腹血糖(Fasting blood glucose，F(xiàn)BG)、空腹胰島素(Fasting insulin，F(xiàn)INS)、甘油三酯(Triglyceride，TG)、總膽固醇(T

9、otal Cholesterol，TC)、高密度脂蛋白膽固醇(High Density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C)、載脂蛋白AⅠ(Apolipoprotein AⅠ，ApoAⅠ)、載脂蛋白B(Apolipoprotein B，ApoB)和游離脂肪酸(Free Fatty Acid，F(xiàn)FA)水平。

10、r>　　 結(jié)果：
　　 尾靜脈注射小劑量STZ溶液輔以高脂高熱卡飼料喂養(yǎng)的方法可成功復(fù)制出2型糖尿病動物模型，實驗動物具有肥胖以及葡萄糖和脂質(zhì)代謝紊亂等特征。 桑精膠囊可顯著提高實驗動物胰島素敏感性和胰島β細胞在基礎(chǔ)狀態(tài)下的分泌功能，降低血清TC、TG、LDL-C、Apo B和FFA水平，同時提高HDL-C和Apo AⅠ水平，并顯示出明顯的減肥作用。
　　 結(jié)論：
　　 桑精膠囊對2型糖尿病模型動物具有較好的減

11、肥、降糖、調(diào)脂作用。
　　 第二部分：桑精膠囊抗小劑量STZ加高脂高熱卡飼料誘導(dǎo)大鼠2型糖尿病的研究
　　 目的：
　　 建立小劑量STZ加高脂高熱卡飼料誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠模型，觀察桑精膠囊抗模型大鼠2型糖尿病的效應(yīng)，探討該方可能的作用機制。
　　 方法：
　　 以尾靜脈注射小劑量STZ加高脂高熱卡飼料喂養(yǎng)的方法建立2型糖尿病大鼠模型，將成模動物隨機分為模型組、二甲雙胍組和桑精膠囊組，另設(shè)正常對

12、照組。藥物干預(yù)治療8周后，檢測各組大鼠糖代謝相關(guān)指標、血清抗氧化酶活性指標、胰腺組織Bax、Bcl-2蛋白表達和靶組織中胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路關(guān)鍵蛋白表達。
　　 結(jié)果：
　　 桑精膠囊可明顯降低2型糖尿病模型動物的空腹血糖和胰島素水平，降低血清丙二醛(Malonaldehyde，MDA)、一氧化氮(Nitric Oxide，NO)水平，提高超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)、谷胱甘肽過氧化物

13、酶（Glutathione Peroxidase，GSH-Px）活性；保護實驗動物胰島形態(tài)，降低胰島組織Bax蛋白表達，增加Bcl-2蛋白表達從而保護胰島；抑制實驗動物靶組織胰島素受體底物-1（Insulin Receptor Substrate-1，IRS-1）Ser307磷酸化，提高IRS-1和磷脂酰肌醇-3激酶（Phosphatidylinositol-3-kinase，PI-3K）蛋白表達，促進葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4（Glucose

14、Transporter 4，GLUT4）轉(zhuǎn)位至細胞膜上，增加細胞膜GLUT4含量，改善糖尿病大鼠靶組織胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，提高外周組織對葡萄糖的利用率，從而改善胰島素抵抗。
　　 結(jié)論：
　　 桑精膠囊對2型糖尿病模型動物具有良好的治療效應(yīng)，其作用機制可能與其保護胰島功能、增強機體抗氧化能力以及改善胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。
　　 第三部分：桑精膠囊拆方抗小劑量STZ加高脂高熱卡飼料誘導(dǎo)大鼠2型糖尿病的研究
　　

15、目的：
　　 建立小劑量STZ加高脂高熱卡飼料誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠模型，研究桑精膠囊拆方抗模型大鼠2型糖尿病效應(yīng)的差異性及其可能的作用機制。
　　 方法：
　　 以尾靜脈注射小劑量STZ加高脂高熱卡飼料喂養(yǎng)的方法建立2型糖尿病大鼠模型，將造模動物隨機分為模型組、二甲雙胍組、桑葉組、桑椹組、桑枝組和桑白皮組，另設(shè)正常對照組。藥物干預(yù)治療8周后，比較各組藥物對糖尿病大鼠體重、葡萄糖和脂質(zhì)代謝參數(shù)、炎癥相關(guān)細胞因子、氧

16、化應(yīng)激相關(guān)指標以及胰腺組織Bax、Bcl-2蛋白表達的影響。
　　 結(jié)果：
　　 桑葉、桑椹、桑枝和桑白皮均可明顯改善實驗動物葡萄糖和脂質(zhì)代謝紊亂，提高實驗動物胰島素敏感性和胰島β細胞在基礎(chǔ)狀態(tài)下的分泌功能，以桑葉降糖、降TG作用最明顯，桑枝降低FFA作用突出。上述諸藥均可提高2型糖尿病大鼠血清抗炎細胞因子水平、降低促炎細胞因子水平，以桑枝和桑白皮作用較為突出。在提高2型糖尿病大鼠抗氧化能力方面，桑葉和桑椹作用最佳。桑葉