水飛薊賓對(duì)乏氧HepG2細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其可能的機(jī)制.pdf

1、目的：水飛薊賓是一種安全性較高的傳統(tǒng)護(hù)肝藥物，近年來發(fā)現(xiàn)其有抗癌作用及對(duì)多種癌癥有化學(xué)預(yù)防作用，但是對(duì)于乏氧HepG2細(xì)胞的影響尚不明確，本實(shí)驗(yàn)采用水飛薊賓作用于氯化鈷（cobalt chloride，CoCl2）誘導(dǎo)的乏氧HepG2細(xì)胞，探討水飛薊賓對(duì)乏氧HepG2細(xì)胞在增殖和凋亡方面的影響及其可能機(jī)制，為水飛薊賓靶向于乏氧肝癌細(xì)胞在臨床方面的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)方法：在體外對(duì)HepG2細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)，在氯化鈷誘導(dǎo)乏氧

2、的同時(shí)加入不同濃度水飛薊賓，MTT檢測(cè)細(xì)胞的增殖抑制率，熒光染色觀察細(xì)胞的凋亡情況，細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)觀察對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響，流式細(xì)胞儀測(cè)定其細(xì)胞周期和凋亡率，用Western Blot法檢測(cè)其低氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α， HIF-1α）和Bcl-2的表達(dá)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：水飛薊賓作用于乏氧HepG2細(xì)胞后，MTT結(jié)果顯示隨著水飛薊賓濃度增加，對(duì)乏氧HepG2細(xì)胞增殖的抑制作用增強(qiáng)，

3、呈時(shí)間-濃度依賴性；DAPI熒光染色顯示隨著藥物濃度升高凋亡細(xì)胞增多；平板集落形成試驗(yàn)顯示隨著藥物濃度增高細(xì)胞集落形成減少；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示隨著藥物濃度增高，G1期和G2期的乏氧HepG2細(xì)胞比例下降，乏氧HepG2細(xì)胞被阻滯在S期，且水飛薊賓可誘導(dǎo)乏氧HepG2細(xì)胞凋亡，呈濃度依賴性；Western Blot顯示隨著藥物濃度增高，乏氧HepG2細(xì)胞的HIF-1α、Bcl-2蛋白表達(dá)降低。
　　結(jié)論：1.水飛薊賓可抑制乏氧Hep