胃癌組織中Caveolin-1和E-cadherin的表達特點和兩者間相關性的判定.pdf

1、本課題在組織病理學觀察的基礎上，利用多種實驗方法，在蛋白質(zhì)和mRNA水平對caveolin-1和E-cadherin的表達情況及二者的位置關系進行同步觀察，并就它們之間的交互影響/作用以及與不同類型胃癌的關系進行細致的研究。 研究材料與方法：胃癌石蠟和冰凍組織標本選自大連醫(yī)科大學細胞生物學教研室(遼寧省高校癌癥基因組學重點實驗室)建立的人癌組織庫。胃癌細胞系AGS、HGC-27購于中國科學院上海分院細胞庫；MGC803、BGC8

2、23均從北京腫瘤研究所引進。采集的胃癌組織按Lauren分型分為腸型和彌漫型兩個亞型，并以癌旁相對正常粘膜和癌前病變(萎縮性胃炎和腸上皮化生)作為對照?；谑灲M織微陣列，結(jié)合組織特定區(qū)域的蛋白定點捕獲，應用免疫組織化學和Western蛋白印跡分析等方法，平行檢測E-cadherin、caveolin-1在不同類型胃組織中的表達特點與分布情況。進一步應用RT-PCR、Western蛋白印記分析及雙標記免疫熒光檢測E-cadherin、c

3、aveolin-1在胃癌細胞系中的表達特點。用Kruskal-Wallis檢驗方法對上述指標在不同類型胃癌組織的表達情況進行差異分析；用Spearman相關分析檢測這兩個指標間的相關性。 研究結(jié)果： 1.在僅有的3例相對正常胃粘膜中，細胞膜上的E-cadherin均為強陽性，而細胞膜上的Caveolin-1均為陰性(由于樣本例數(shù)太少，未列入統(tǒng)計學運算)。胃癌組織與癌前病變相比，細胞膜上的E-cadherin表達明顯減少(

4、P＜0.01)；而且，E-cadherin在彌漫型胃癌中的表達水平明顯低于在腸型胃癌中的表達(P＜0.01)。胃癌組織與癌前病變相比，caveolin-1在細胞膜上的分布無差異(P＞0.05)；而caveolin-1的表達在腸型胃癌和彌漫型胃癌之間存在明顯差異(P＜0.01)，即caveolin-1在彌漫型胃癌中的表達水平明顯低于腸型胃癌。在22例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中，20例(90.9﹪)有caveolin-1細胞膜表達，4例(18.2﹪)有

5、E-cadherin細胞膜表達。 2.Caveolin-1與E-cadherin相關性分析的結(jié)果為：在腸型胃癌中，細胞膜上caveolin-1和E-cadherin的表達無相關性；在腸型胃癌的胞漿中，caveolin-1和E-cadherin的表達亦無相關性。在彌漫型胃癌中，細胞膜上的caveolin-1和E-cadherin的表達之間沒有相關性，在彌漫型胃癌的胞漿中caveolin-1與E-cadherin的表達呈正相關(r=

6、0.642，P＜0.01)。 3.胃癌組織的Western蛋白印跡結(jié)果顯示：與癌前病變相比，彌漫型胃癌與腸型胃癌中E-cadherin的表達均降低，但E-cadherin在彌漫型胃癌中的表達更低甚至無表達。與癌前病變相比，caveolin-1在腸型胃癌和彌漫型胃癌中的表達無明顯變化，即無增減趨勢。由于腫瘤的間質(zhì)(血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等)也有caveolin-1的表達，從而影響了對caveolin-1真實表達情況的判定。

7、 4.雙標記免疫熒光染色的結(jié)果示：形態(tài)學上未看到caveolin-1和E-cadherin在胃癌細胞膜上或胞漿中有明確的相同的位置關系，即未看到大量明顯的黃色熒光。從mRNA和蛋白水平觀察AGS、HGC-27、MGC803和BGC823這四個人胃癌細胞系，caveolin-1與E-cadherin的mRNA含量及其相應的蛋白表達高低并不一致，即無規(guī)律性。 研究結(jié)論： 1)與癌前病變相比，細胞膜E-cadherin在胃癌

8、組織中的表達降低，而細胞膜caveolin-1在胃癌中表達無明顯變化；但兩者的表達水平均與胃癌的分化程度密切相關，即細胞膜上的caveolin-1與E-cadherin在彌漫型胃癌中的表達水平明顯低于在腸型胃癌中的表達。 2)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中，黏附分子E-cadherin缺失尤為明顯，這很可能有利于腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移；而caveolin-1呈高頻率表達，這可能有利于腫瘤細胞在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的生存。但目前還缺乏后者對前者具有調(diào)節(jié)