應(yīng)用RNAi技術(shù)研究DICER1和E-cadherin基因與胃癌的相關(guān)性.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文應(yīng)用RNAi技術(shù)研究DICER1和Ecadherin基因與胃癌的相關(guān)性姓名：鄭志紅申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：孫開來20050301中文論著摘要j、___，第一部分抑制E—cadherin基因表達對胃癌細胞侵襲力的影響摘要腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移是一個多步驟的發(fā)展過程，涉及許多基因的改變，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的基因。細胞黏附分子E—cadherin蛋白是維持上皮細胞極性及細胞間連接的糖蛋白，其結(jié)

2、構(gòu)和功能的異?？蓪?dǎo)致細胞間黏附能力減弱，在腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要的作用。在許多胃癌組織和胃癌細胞系中E—cadherin基因表達缺失。E—cadherin基因抑制腫瘤浸潤最直接的證據(jù)是將未分化的具有侵襲性的腫瘤細胞轉(zhuǎn)染正常的E—cadherincDNA后逆轉(zhuǎn)為分化表型的細胞。為了充分證明E—cadherin對腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移抑制功能，我們應(yīng)用RNA干涉技術(shù)抑制MKN45細胞中E—cadherin基因的表達，分析RNA干涉前后細胞侵襲力

3、的改變，以說明E—cadherin在腫瘤轉(zhuǎn)移抑制中的作用，并且分別針對該基因5端非編碼區(qū)和下游編碼區(qū)設(shè)計不同的siRNA，分析他們對E—cadherin基因的抑制效應(yīng)，本研究對進一步分析RNA干涉的分子機制和更有效的利用RNAi作為工具進行基因功能的研究等具有重要的意義。材料及方法胃癌細胞系MKN45，由日本理化研究所橫山和尚教授惠贈，來源于低分化腺癌，細胞培養(yǎng)于含10％小牛血清、100U／ml青霉素和100ug／ml鏈霉素的RPMll