透明質酸酶對眼眶成纖維細胞的作用研究.pdf

1、目的：觀察透明質酸酶對體外培養(yǎng)的正常人的球后成纖維細胞生長的抑制作用以及其對細胞分泌的透明質酸的影響，為臨床上透明質酸酶治療甲狀腺相關眼病提供實驗室依據(jù)。 方法： 1.組織塊法培養(yǎng)人眶成纖維細胞，觀察細胞的生長狀況及特性，HE染色了解其形態(tài)學特點，免疫組化染色鑒定細胞來源。 2.應用濃度分別為5、10、25、50、100μg/ml的透明質酸酶，分別作用于培養(yǎng)的成纖維細胞，在24、48、72小時觀察成纖維細胞形態(tài)的

2、變化，應用MTT比色法、放射免疫分析法觀察不同濃度透明質酸酶對眶成纖維細胞增殖及分泌透明質酸的作用。 結果： 1.體外培養(yǎng)的眶成纖維細胞生長良好，傳代穩(wěn)定，細胞呈梭形或星形，免疫組化鑒定波形蛋白陽性。 2.不同濃度(5～100μg/ml)的透明質酸酶作用于眶成纖維細胞24、48、72小時，MTT法所測量的OD值雖然低于正常對照組，但經(jīng)SPSS11.5軟件包進行統(tǒng)計分析，差異無顯著性(P＞0.05)。 3.

3、放射免疫法測量細胞培養(yǎng)上清液中透明質酸的量，不同濃度的透明質酸酶(5～100μg/ml)作用于眶成纖維細胞24、48、72小時后，培養(yǎng)上清液中HA含量明顯減少，與對照組相比，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。并且隨著藥物濃度的增加及作用時間的延長，細胞培養(yǎng)上清液中HA的含量越少。 結論： 1.本實驗成功培養(yǎng)出眶成纖維細胞，細胞傳代穩(wěn)定，為甲狀腺相關眼病的研究提供了實驗模型。 2.透明質酸酶對眶成纖維細胞的增殖的