前列地爾對糖尿病腎病小鼠血管生成素2及IL-18表達的影響.pdf

1、目的：通過建立小鼠糖尿病腎病模型,探討血管生成素2和IL-18在糖尿病腎病發(fā)病中的作用并探討改善微循環(huán)藥物前列地爾對腎臟的保護作用機制。
　　方法：將8周齡C57BL/6J雄性小鼠隨機分為3組:正常對照組(n=15),糖尿病腎病模型組(n=15),前列地爾干預組(n=18)。給予模型組和干預組小鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(140mg/kg)誘導糖尿病腎病模型。糖尿病腎病模型誘導成功后開始藥物干預,每日給予前列地爾80μg/kg腹腔

2、注射。分別于前列地爾干預2周末、4周末、8周末時,放于代謝籠中收集24h尿液,并采血,隨后處死小鼠,取出雙側(cè)腎臟。檢測血糖、腎功能、血脂、24h尿蛋白定量、肌酐清除率(Ccr)、腎臟肥大指數(shù)。PAS染色觀察腎臟病理形態(tài)變化。逆轉(zhuǎn)錄PCR(ReversetranscriptionPCR,RT-PCR)檢測糖尿病腎病早期腎臟血管生成素1(Angiopoietin-1,Ang-1)、血管生成素2(Angiopoietin-2,Ang-2)、酪

3、氨酸激酶受體2(tie-2)、血管內(nèi)皮生長因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)、白介素-18(Interleukin-18,IL-18)mRNA的表達。免疫組織化學方法檢測腎臟Ang-2和IL-18蛋白表達及分布。
　　結果：①與對照組同時間點相比,2周、4周、8周模型組和干預組血糖、24h尿蛋白定量、腎臟肥大指數(shù)、Ccr明顯升高(P<0.05);與模型組同時間點相比,干預組血糖、腎臟肥

4、大指數(shù)無顯著差異,24h尿蛋白、Ccr明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);與對照組同時間點相比,2周、4周、8周模型組和干預組血肌酐、膽固醇、甘油三酯無明顯變化,模型組和干預組間也無顯著差異(P>0.05)。②與對照組相比,模型組組腎小球體積明顯增大,系膜區(qū)增寬,腎小管上皮細胞濁腫;前列地爾治療后上述病理改變減輕。③與對照組同時間點相比,2周、4周、8周模型組Ang-2、IL-18mRNA的表達量明顯增加(P<0.01),VEG

5、F和tie2mRNA表達也有增加,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),Ang-1mRNA表達量無顯著差異;與模型組同時間點相比,2周、4周和8周干預組Ang-2mRNA表達明顯減少(P<0.05);VEGF和tie2的表達量也有降低,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);IL-18mRNA表達量在4W、8W時明顯減低(P<0.05);Ang-1mRNA表達無顯著差異。④免疫組織化學結果顯示Ang-2主要在腎小球內(nèi)皮細胞表達,腎小管中未見表

6、達;IL-18主要在腎小球中表達,腎小管中也有少量表達。與對照組同時間點相比,2周、4周和8周模型組Ang-2和IL-18表達明顯增加(P<0.05),與模型組同時間點相比,干預組Ang-2和IL-18在4W、8W時表達明顯減少(P<0.05)。⑤Ang-2mRNA表達與IL-18mRNA表達顯著正相關,Ang-2蛋白表達與IL-18蛋白表達顯著正相關。
　　結論：(1)Ang-2和IL-18在糖尿病腎病小鼠腎組織中表達增加,且二