氯沙坦鉀對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟組織ET-1和IL-18表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過STZ誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠動(dòng)物模型建立，觀察內(nèi)皮素-1（ET-1)和白細(xì)胞介素-18(IL-18)在其腎臟組織中的表達(dá)，探討氯沙坦鉀腎臟保護(hù)機(jī)制，用于指導(dǎo)臨床藥物治療。
　　方法：選取Sprague-Dawley大鼠（雄性）54只，體重185～225g，由山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，清潔飼養(yǎng)。本實(shí)驗(yàn)分為3組，每組18只，分別為正常對(duì)照組（NC）、糖尿病組（DM）、氯沙坦鉀干預(yù)組（DM-L）。對(duì)照組給予普通飼料喂養(yǎng)，模型

2、組給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)，6周后對(duì)照組大鼠體重增至275.6±23.8(g)，模型組體重增至310.1±29.2(g)。禁食12h后，NC組給予腹腔注射40mg/kg的檸檬酸-檸檬酸鈉溶液。其余大鼠給予腹腔注射相同劑量的鏈脲佐菌素（STZ）。72小時(shí)采靜脈血（尾尖取血），以連續(xù)三次隨機(jī)血糖≥16.7mmol/L為造模成功。每組均于成模后開始給藥，藥物干預(yù)組給予氯沙坦鉀生理鹽水混懸液50mg.kg-1.d-1灌胃，正常對(duì)照組和糖尿病組給予等

3、體積生理鹽水灌胃。于實(shí)驗(yàn)的第4、8、12周，每組各取6只大鼠，將其禁食12小時(shí)后稱體重，測(cè)空腹血糖（尾尖取血）；實(shí)施麻醉后腔靜脈采血，分離血清，測(cè)定空腹血胰島素；將大鼠處死切取腎臟秤重，計(jì)算腎臟肥大指數(shù)；將代謝籠收集好的大鼠24小時(shí)尿液，通過放射免疫法測(cè)定24h尿白蛋白排泄率；RT-PCR檢測(cè)腎組織中ET-1及IL-18mRNA；制備病理切片，免疫組化法檢測(cè)上述兩種因子蛋白表達(dá)；HE染色，電鏡觀察腎臟病理改變。
　　結(jié)果：

4、　　1、各組大鼠空腹血糖及空腹血胰島素的比較：與NC組相比，DM組、DM-L組兩組大鼠空腹血糖增高，空腹血胰島素下降（P<0.05)。
　　2、各組大鼠腎臟肥大指數(shù)比較：與NC組相比，同期DM組及DM-L組腎臟肥大指數(shù)明顯升高（P<0.05）；與DM組相比，DM-L組腎臟肥大指數(shù)有所降低，但仍高于NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3、各組大鼠24小時(shí)尿白蛋白排泄率比較：與NC組相比，DM組、DM-L組大鼠24小

5、時(shí)尿白蛋白排泄率均明顯升高（P<0.05）；與DM組相比，DM-L組24小時(shí)尿白蛋白排泄率明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　4、各組大鼠腎臟組織ET-1和IL-18蛋白的表達(dá)：NC組腎組織中ET-1和IL-18蛋白呈現(xiàn)明顯低度表達(dá)，上述因子在DM組的表達(dá)同NC組比明顯上升（P<0.05），在DM-L組的表達(dá)同DM組相比明顯下降（P<0.05），但仍較NC組偏高（P<0.05）。隨著時(shí)間推移，DM組腎組織ET-1和I

6、L-18表達(dá)升高（P<0.05）；DM-L組表達(dá)降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5、光鏡下腎組織形態(tài)學(xué)觀察：NC組腎小管形態(tài)、結(jié)構(gòu)、分布以及腎小球結(jié)構(gòu)，均未出現(xiàn)明顯病理改變。DM組隨著病程延長(zhǎng)，逐漸表現(xiàn)為腎小管系膜細(xì)胞增生、基質(zhì)增多、腎小管擴(kuò)張、腎小球肥大。DM-L組隨著治療時(shí)間延長(zhǎng)，上述改變逐漸減輕。
　　6、12周各組大鼠腎組織ET-1和IL-18mRNA表達(dá)的比較：與NC組比較，DM組及DM-L組ET-1和IL-18表

7、達(dá)升高(P<0.05)；與DM組相比，DM-L組IL-18和ET-1表達(dá)降低(P<0.05)。
　　7、通過Pearson相關(guān)分析顯示：糖尿病大鼠腎組織中ET-1和IL-18的表達(dá)均與其24小時(shí)尿白蛋白排泄率具有顯著正相關(guān)。
　　結(jié)論：糖尿病大鼠腎組織中炎癥因子ET-1和IL-18水平升高，24小時(shí)尿白蛋白排泄率升高，給予氯沙坦鉀干預(yù)后，大鼠腎組織ET-1和IL-18表達(dá)明顯下降，且24小時(shí)尿白蛋白排泄率亦明顯降低，故表明氯