ECHS1基因在肝癌細胞遷移中的作用及其機制研究.pdf

1、目的：肝細胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）是一種發(fā)病率高、病程短、且生存率極低的惡性腫瘤，占腫瘤致死病因的第二位，僅次于肺癌。大部分肝癌患者就診時已發(fā)現(xiàn)肝癌浸潤和轉(zhuǎn)移，嚴重影響預后和生存，目前尚無有效的治療肝癌的方法，近年來分子基因靶向治療惡性腫瘤成為醫(yī)學研究熱點。本課題主要探索烯脂酰輔酶A水合酶短鏈1（Short chain enoyl-CoA hydratase，ECHS1）對肝癌細胞遷移能力的影響及

2、其相關機制。
　　方法：首先應用RNA干擾（RNA interference，RNAi）技術構建穩(wěn)定干擾ECHS1基因的肝癌細胞株HepG2和Huh7，Western Blot檢測其干擾效果。隨后應用細胞劃痕實驗和Transwell實驗檢測ECHS1干擾后的兩組肝癌細胞遷移情況。為探索其相關機制,RT-PCR檢測比較HepG2細胞干擾組和對照組中細胞遷移相關的多種基因mRNA相對表達量，最后利用Western Blot方法研究細胞

3、遷移相關蛋白的表達水平。
　　結果：成功構建了兩組干擾ECHS1表達的肝癌細胞株HepG2和Huh7（HepG2-siECHS1及其對照細胞株HepG2-pU6、Huh7-siECHS1及其對照細胞株Huh7-pLV)），Western Blot驗證兩組細胞干擾效果顯著（P<0.05）。細胞劃痕實驗和Transwell實驗結果顯示ECHS1干擾后的肝癌細胞遷移能力減弱。RT-PCR和Western Blot提示肝癌細胞干擾ECHS