NRAGE基因?qū)Ω伟┘?xì)胞生長(zhǎng)的影響及作用機(jī)制的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、NRAGE(neurotrophin receptor—interacting MAGE homolog)是MAGE(黑色素瘤抗原)家族的一員。大部分MAGE家族的蛋白僅在腫瘤中表達(dá),而NRAGE卻在發(fā)育早期和成年期的許多組織中都有表達(dá),最近的研究表明在某些類型的腫瘤中NRAGE的表達(dá)量較低,這揭示其可能與致癌作用有關(guān)。一些報(bào)道還顯示NRAGE與細(xì)胞周期抑制及細(xì)胞凋亡相關(guān)。對(duì)于該基因在細(xì)胞內(nèi)功能的研究尚處于初步階段。我們從人胎盤cDNA

2、文庫(kù)中克隆而來(lái)的hNRAGE,它的過(guò)表達(dá)能抑制肝癌細(xì)胞的增殖。本論文利用重組腺病毒表達(dá)載體研究人NRAGE基因在體外和體內(nèi)對(duì)于肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。Akt是磷脂酰肌醇—3羥基激酶(PI3Ks)下游關(guān)鍵效應(yīng)分子,激活后可通過(guò)滅活凋亡效應(yīng)分子如又頭轉(zhuǎn)錄因子、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9、糖原合成酶激酶3和BAD等而促進(jìn)細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞增殖。
   本研究利用重組腺病毒Ad—hNRAGE/RNAi轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞,干擾NRAGE基因的表

3、達(dá)。Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染了Ad—hNRAGE/RNAi的HepG2細(xì)胞中NRAGE的表達(dá)量有明顯下降。采用MTT法檢測(cè)HepG2細(xì)胞的增殖率,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染了Ad—hNKAGE/RNAi的HepG2細(xì)胞的增殖率有顯著下降。流式細(xì)胞術(shù)分析HepG2細(xì)胞周期的進(jìn)程,結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染了重組腺病毒Ad—hNRAGE/RNAi之后,HepG2細(xì)胞G0—G1和G2—M期的細(xì)胞增多,S期的細(xì)胞相對(duì)減少。綜上,hNRAGE基因可能

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