NRAGE基因?qū)Ω伟┘毎L的影響及作用機制的研究.pdf

1、NRAGE(neurotrophin receptor—interacting MAGE homolog)是MAGE(黑色素瘤抗原)家族的一員。大部分MAGE家族的蛋白僅在腫瘤中表達，而NRAGE卻在發(fā)育早期和成年期的許多組織中都有表達，最近的研究表明在某些類型的腫瘤中NRAGE的表達量較低，這揭示其可能與致癌作用有關(guān)。一些報道還顯示NRAGE與細胞周期抑制及細胞凋亡相關(guān)。對于該基因在細胞內(nèi)功能的研究尚處于初步階段。我們從人胎盤cDNA

2、文庫中克隆而來的hNRAGE，它的過表達能抑制肝癌細胞的增殖。本論文利用重組腺病毒表達載體研究人NRAGE基因在體外和體內(nèi)對于肝癌細胞生長的影響。Akt是磷脂酰肌醇—3羥基激酶(PI3Ks)下游關(guān)鍵效應(yīng)分子，激活后可通過滅活凋亡效應(yīng)分子如又頭轉(zhuǎn)錄因子、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9、糖原合成酶激酶3和BAD等而促進細胞周期進程和細胞增殖。
　　 本研究利用重組腺病毒Ad—hNRAGE/RNAi轉(zhuǎn)染HepG2細胞，干擾NRAGE基因的表

3、達。Western blot檢測發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，轉(zhuǎn)染了Ad—hNRAGE/RNAi的HepG2細胞中NRAGE的表達量有明顯下降。采用MTT法檢測HepG2細胞的增殖率，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染了Ad—hNKAGE/RNAi的HepG2細胞的增殖率有顯著下降。流式細胞術(shù)分析HepG2細胞周期的進程，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染了重組腺病毒Ad—hNRAGE/RNAi之后，HepG2細胞G0—G1和G2—M期的細胞增多，S期的細胞相對減少。綜上，hNRAGE基因可能