奧沙利鉑誘導人舌鱗癌細胞株Tca8113凋亡及凋亡抑制基因Survivin表達的改變.pdf

1、目的：體外研究鉑類抗癌藥奧沙利鉑(L-OHP)能否誘導人舌鱗癌細胞株Tca8113凋亡以及L-OHP作用過程中凋亡抑制基因survivin表達的改變。 方法：應用MTT法檢測L-OHP不同濃度(16、32、64、128、256μmol/L)對Tca8113細胞增殖的影響，并確定中效濃度：光鏡和電鏡形態(tài)下觀察中效濃度的L-OHP對細胞增殖的影響及凋亡形態(tài)，再用流式細胞儀觀察細胞周期的改變，并定量測定凋亡率變化；分別應用免疫細胞化學

2、方法和RT-PCR研究L-OHP作用于Tca8113細胞過程中凋亡抑制基因survivin表達變化。 結果：1.5種濃度的L-OHP均能夠抑制Tca8113細胞的增殖，48～72小時達到高峰；2.倒置顯微鏡下Tca8113細胞形態(tài)發(fā)生了顯著變化：泡化、扭曲、固縮、脫離貼壁生長；透射電鏡下中效濃度的L-OHP作用Tca8113細胞72小時后出現(xiàn)了典型的細胞凋亡形態(tài)：細胞核固縮，染色質凝集及凋亡小體形成等；3.流式細胞儀觀察L-OH

3、P作用后Tca8113細胞周期阻滯于S期和G2/M期，48h、72h凋亡率變化有統(tǒng)計學意義(p<0.05)，且出現(xiàn)了典型的亞二倍體峰；4.L-OHP作用Tca8113細胞24、48及72小時免疫細胞化學方法可見survivin不同度增強表達；5.L-OHP作用Tca8113細胞24、48及72小時后RT-PCR法檢測示survivinmRNA表達上調，除24h外，其余2個時相點加藥組、對照組的上調有顯著性差異(p<0.05)。