左卡尼汀對高糖條件下視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、目的：原代培養(yǎng)新生大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞,建立高糖模型后,探討左卡尼汀對高糖條件下視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用。
　　 方法：取出生后1-3d SD大鼠視網(wǎng)膜,0.25%胰蛋白酶消化制成不同大小細(xì)胞團(tuán)的懸液,接種于包有多聚賴氨酸的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化,取7-9天細(xì)胞進(jìn)行神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)免疫熒光鑒定。取8-10天的細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)為5組:正常細(xì)胞培養(yǎng)組(對照組)、高糖模型組、高糖模型組+左卡尼汀

2、(50μmol/L)、高糖模型組+左卡尼汀(100μmol/L)、高糖模型組+左卡尼汀(200μmol/L),用MTT法檢測細(xì)胞OD值來反映視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞活性,以電子自旋共振法(ESR)檢測各組一氧化氮(NO)及活性氧(ROS)的釋放來反映氧化應(yīng)激程度。
　　 結(jié)果：免疫熒光顯示,培養(yǎng)的細(xì)胞大部分抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體反應(yīng)陽性。MTT結(jié)果顯示高糖模型細(xì)胞活性顯著降低(P<0.05),左卡尼汀濃度100μmol/L,作用時(shí)間4