THAP11在造血細(xì)胞分化中的作用研究.pdf

1、THAP11是THAP蛋白家族的最新成員，前期研究表明THAP11是調(diào)控細(xì)胞生長、胚胎形成和ES細(xì)胞多能性的一個轉(zhuǎn)錄因子，THAP11通過下調(diào)c-Myc抑制細(xì)胞增殖。c-Myc是調(diào)控紅系巨核系分化的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，并且表達(dá)譜數(shù)據(jù)顯示THAP11在造血干細(xì)胞、多能祖細(xì)胞和人臍帶血CD34+CD38-細(xì)胞中高表達(dá)，提示THAP11可能參與造血細(xì)胞分化，但目前對于THAP11在造血分化中的作用尚未報(bào)道。
　　本論文對THAP11對造血細(xì)胞

2、分化的影響進(jìn)行了深入研究。首先，通過檢測THAP11在人臍帶血CD34+細(xì)胞向紅系和巨核系分化過程中的表達(dá)變化，發(fā)現(xiàn)THAP11在向紅系分化中表達(dá)下調(diào)，而在巨核分化中表達(dá)上調(diào)，提示THAP11參與紅系/巨核系分化的調(diào)控。接著我們構(gòu)建了THAP11過表達(dá)及RNAi的第三代慢病毒載體，通過病毒包裝獲得慢病毒顆粒，建立了過表達(dá)和敲低THAP11的K562和TF-1細(xì)胞穩(wěn)定株。采用hemin誘導(dǎo)K562細(xì)胞向紅系分化模型，發(fā)現(xiàn)THAP11過表達(dá)

3、可抑制紅系分化，表現(xiàn)為抑制GPA和HBA的上調(diào)，聯(lián)苯胺染色陽性細(xì)胞比例降低，而敲低THAP11則促進(jìn)紅系分化。利用EPO誘導(dǎo)TF-1細(xì)胞向紅系分化的模型，得到相同的結(jié)果。采用PMA誘導(dǎo)K562細(xì)胞向巨核系分化，發(fā)現(xiàn)THAP11過表達(dá)可促進(jìn)巨核系標(biāo)志物CD61的表達(dá)和多倍體形成，與之相反，敲低THAP11則抑制了巨核分化。初步研究表明THAP11可上調(diào)GATA-2和Fli1基因，下調(diào)c–Myc和c-Myb基因的表達(dá)，提示THAP11對造血