THAP11基因抑制細胞增殖及其機制的研究.pdf

1、THAPll屬于新發(fā)現(xiàn)的THAP蛋白家族。該家族因含有與P元件轉(zhuǎn)座酶DBD高度同源的THAP結(jié)構(gòu)域而得名。研究表明這是一類鋅離子依賴的DNA結(jié)合蛋白，廣泛參與細胞增殖、凋亡調(diào)控，并可能與染色體修飾／重構(gòu)相關(guān)。 THAP11表達廣泛，無明確組織特異性。cDNA微陣列芯片檢測顯示，與相應癌旁組織相比，THAPll在多種腫瘤組織中表達明顯下調(diào)；采用可誘導表達THAPll的HEK293穩(wěn)定細胞株發(fā)現(xiàn)：誘導THAPll表達可抑制HEK29

2、3細胞增殖。此外，THAPll表達也能明顯抑制7721、HeLa和MCF-7細胞的集落形成能力，說明THAP11是一個生長抑制基因。進一步研究發(fā)現(xiàn)THAP11通過抑制c-myc啟動子的轉(zhuǎn)錄活性，引起c-myc表達下調(diào)，以及ODC、Nucleolin等c-myc靶基因表達下調(diào)，進而導致細胞生長抑制。轉(zhuǎn)染c-myc表達質(zhì)粒，恢復c-myc表達，能使THAP11引發(fā)的集落形成抑制現(xiàn)象得到顯著緩解，表明負調(diào)控c-myc轉(zhuǎn)錄是THAPll抑制增殖

3、的重要原因。 鑒于c-myc在細胞增殖、分化以及細胞惡性轉(zhuǎn)化過程中的重要地位，研究了THAPll抑制c-myc轉(zhuǎn)錄的機制。通過構(gòu)建c-myc啟動子缺失突變的報告基因載體，將THAPll實現(xiàn)調(diào)控的區(qū)域定位在c-mycP2啟動子上游-710bp～-484bp處；ChIP實驗證實THAP11在體內(nèi)能與這一區(qū)域的DNA序列結(jié)合；合成探針并用EMSA實驗確定了THAPll識別并結(jié)合的特異DNA序列，說明THAP11通過結(jié)合在c-myc啟動