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文檔簡介
1、目的:漢黃芩素(Wogonin,WOG)是從我國傳統(tǒng)中藥黃芩(Scutellariabaicalensis Georgi)中提取的黃酮類化合物。本文旨在研究漢黃芩素在體外對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2 增殖的影響并探討其可能的分子作用機(jī)制。
方法:以人肝癌細(xì)胞株HepG2為研究對(duì)象,應(yīng)用MTT 法檢測漢黃芩素對(duì)其增殖的影響;熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化;流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡率和線粒體膜電位變化;Western blot 檢測細(xì)胞
2、中相關(guān)蛋白的表達(dá);熒光顯微鏡測活性氧水平變化。
結(jié)果:
(1)0~200μmol/L的漢黃芩素對(duì)HepG2細(xì)胞的增殖有顯著抑制作用,并呈劑量和時(shí)間依賴性。48 h的IC50是115.14μmol/L。
(2)熒光顯微鏡觀察結(jié)果表明,經(jīng)漢黃芩素處理48 h后,細(xì)胞發(fā)生染色質(zhì)濃縮,核碎裂以及凋亡小體形成等形態(tài)學(xué)變化。
(3)流 式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示,漢黃芩素作用細(xì)胞后,細(xì)胞凋亡率顯著增
3、加,線粒體膜電位顯著下降。
(4)Western blot 結(jié)果表明,漢黃芩素能夠活化caspase-3和caspase-9,對(duì)caspase-8 無明顯作用;上調(diào)抑制生長的蛋白因子Bax的表達(dá)水平,下調(diào)促進(jìn)生長的蛋白因子Bcl-2蛋白表達(dá)水平,促進(jìn)線粒體釋放Cytochrome C。
(5)熒光顯微鏡和酶標(biāo)儀檢測結(jié)果顯示漢黃芩素作用8 h,細(xì)胞中活性氧水平前4h上升,后4 h下降。
結(jié)論:漢黃
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