利用畢赤酵母系統(tǒng)表達重組蛋白.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、畢赤酵母表達系統(tǒng)是目前最為成功的外源蛋白表達系統(tǒng)之一。該系統(tǒng)操控簡單、經濟，表達量高，具有翻譯后修飾的能力，不存在原核表達系統(tǒng)內毒素難以去除的問題，也不存在哺乳動物細胞表達系統(tǒng)的病毒和支原體污染問題。目前已有多種外源蛋白在該系統(tǒng)中成功表達。我們利用該系統(tǒng)表達了幾種重組蛋白。 1.復合干擾素突變體根據畢赤酵母密碼子偏性合成了復合干擾素突變體基因，構建了分泌型酵母表達載體，線性化后轉化GS115。在發(fā)酵罐中進行了高密度發(fā)酵，表達量為

2、112mg/L，發(fā)酵上清經超濾、三步層析純化獲得純度大于98％的重組蛋白，比活性大于6×108IU/mg。 2.人干擾素-β1a合成了人IFN-β1a基因，構建了酵母表達載體，線性化后轉化GS115。甲醇誘導轉化子，細胞病變抑制法測定誘導上清的抗病毒活性，培養(yǎng)上清中的表達量為2×105IU/mL。 3.組織型纖溶酶原激活劑衍生物rPAm構建了rPAm的酵母表達載體，并在畢赤酵母分泌表達，培養(yǎng)上清中的表達量為1.6mg/L

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